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胡乱走走2011银虫 (著名写手)
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pEASY-E1使用中出现的问题 已有4人参与
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本人用pEASY-E1作为表达载体，先将目的片段和该载体连接，然后转化进Trans-T1感受态细胞中克隆，跳去阳性单克隆菌落进行PCR鉴定，和预期大小一致。然后提取质粒，转化进BLDE23细胞中进行表达，过夜培养后，没有菌落长出来，37.继续过夜，仅有2个克隆，提取鉴定后为假克隆。 请过来人指教下哪里出了问题？是质粒能直接转化BL21(DE3)细胞吗？ 谢谢。 [ Last edited by 胡乱走走2011 on 2012-6-7 at 16:59 ] |
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