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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 蛋白表达量的提高
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675250244

银虫 (小有名气)

[交流] 蛋白表达量的提高

最近用pET32a为载体表达一蛋白（30多KD），发现产量太低了，想通过优化培养基配方（如添加甘油等）提高其表达量，但一直不见效果，求解答。
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1楼 2012-06-05 08:44:56
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
24楼: Originally posted by 675250244 at 2012-06-16 10:09:14
这诱导方面我也进行了优化，但是蛋白的量还是没有很明显的提高，关于溶氧的问题，不知道怎么测定溶氧量？...

不会是你发酵没有测定溶氧吧？溶氧是非常关键的，在表达与生长过程中。我们都是用自动溶氧电极。难不成你的发酵罐没有这个玩意儿？
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25楼2012-06-16 11:51:37
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
675250244(金币+1): 谢谢参与
scelab: 金币+2, 谢谢回复哦~ 2012-06-06 23:01:28
优化温度；IPTG浓度；实在不行只能进行密码子优化.
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8楼2012-06-05 13:05:41
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)
★
675250244(金币+1): 谢谢参与
诱导型表达载体，增加诱导剂的量是促进表达的方法，试试看
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9楼2012-06-05 14:47:20
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flownaway

铁杆木虫 (正式写手)
★
675250244(金币+1): 谢谢参与
加入IPTG，优化一下诱导的浓度、时间和温度，再试试从对数期开始诱导
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12楼2012-06-06 11:35:33
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依窗赏月5楼
2012-06-05 09:08   回复  
675250244(金币+1): 谢谢参与
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