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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 分离纯化极性很强的未知抗生素
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4679540

银虫 (初入文坛)

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠，小弟做分离纯化已有一段日子了，特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质，在碱性条件下容易失活，小分子物质，用阳离子交换树脂粗分，薄层上显示三个条带，两条带没有活性。液相结果显示很纯，可能是杂质紫外没有吸收峰，也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质，首先想到的是过凝胶柱，如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办？对分离纯化已经很受伤了，希望大侠们畅所欲言，对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法，不胜感激~
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1楼 2012-06-04 16:37:59
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4679540

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
25楼: Originally posted by 俗妮儿~ at 2012-09-18 10:32:31
你把液相的检测波长设在210nm，杂质峰有可能就看见了。
如果还是一个大峰，建议你跑一个10%-100%甲醇水梯度，看看每个峰出在什么梯度下，然后选择低于这个梯度的10%-20%的洗脱剂洗脱（这个比例说不好，可能你要自己 ...

哎，苦逼啊！老板根本不懂分离纯化，对我不闻不问，只关心他懂的方面的课题，想都不要想买什么HILIC柱子。我现在是做一天和尚撞一天钟，本来很有信心做下去，现在一点没了。非常感谢你啊！
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26楼2012-09-19 15:12:21
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个……根据条件试试别的柱子啊，反相，疏水等都试试，同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。
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2楼2012-06-05 15:30:55
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4679540

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-05 15:30:55
这个……根据条件试试别的柱子啊，反相，疏水等都试试，同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。

我们老师不懂，又不舍得花钱。只要是我们实验室有的我都试过了。我离子交换柱条件摸了很久，现在差不多是最好了，但是还是有杂质。反相、疏水什么的都没有。我最近在过凝胶，不行就试试硅胶了。哎~
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3楼2012-06-05 20:10:29
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

大小差不多的话用凝胶很难分开吧？
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4楼2012-06-06 08:28:30
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