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银虫 (初入文坛)

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠,小弟做分离纯化已有一段日子了,特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质,在碱性条件下容易失活,小分子物质,用阳离子交换树脂粗分,薄层上显示三个条带,两条带没有活性。液相结果显示很纯,可能是杂质紫外没有吸收峰,也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质,首先想到的是过凝胶柱,如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办?对分离纯化已经很受伤了,希望大侠们畅所欲言,对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法,不胜感激~
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银虫 (初入文坛)

引用回帖:
25楼: Originally posted by 俗妮儿~ at 2012-09-18 10:32:31
你把液相的检测波长设在210nm,杂质峰有可能就看见了。
如果还是一个大峰,建议你跑一个10%-100%甲醇水梯度,看看每个峰出在什么梯度下,然后选择低于这个梯度的10%-20%的洗脱剂洗脱(这个比例说不好,可能你要自己 ...

哎,苦逼啊!老板根本不懂分离纯化,对我不闻不问,只关心他懂的方面的课题,想都不要想买什么HILIC柱子。我现在是做一天和尚撞一天钟,本来很有信心做下去,现在一点没了。非常感谢你啊!
26楼2012-09-19 15:12:21
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。
2楼2012-06-05 15:30:55
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-05 15:30:55
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。

我们老师不懂,又不舍得花钱。只要是我们实验室有的我都试过了。我离子交换柱条件摸了很久,现在差不多是最好了,但是还是有杂质。反相、疏水什么的都没有。我最近在过凝胶,不行就试试硅胶了。哎~
3楼2012-06-05 20:10:29
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

大小差不多的话用凝胶很难分开吧?
4楼2012-06-06 08:28:30
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