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4679540

银虫 (初入文坛)

[求助] 分离纯化极性很强的未知抗生素

各位大侠,小弟做分离纯化已有一段日子了,特来求教。我这是极性很强的抗真菌活性物质,在碱性条件下容易失活,小分子物质,用阳离子交换树脂粗分,薄层上显示三个条带,两条带没有活性。液相结果显示很纯,可能是杂质紫外没有吸收峰,也可能是杂质峰在包括在活性峰里。下一步当然是要除去杂质,首先想到的是过凝胶柱,如果杂质和活性物质分子量差不多该肿么办?对分离纯化已经很受伤了,希望大侠们畅所欲言,对分离纯化我的这种物质有没有好的建议和看法,不胜感激~
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zjl01234

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by 4679540 at 2012-07-18 20:27:22
其实我也知道,我现在能跑出一个点,液相也还好,冷冻干燥能得到白色粉末。但老板怀疑我的分离纯化步骤。再请教你一个问题,如果100ml样品直接浓缩成10ml。这算不算分离纯化的步骤?如果100ml样品我把杂质去掉几乎 ...

这。。。浓缩算分离纯化中一个步骤。。但不算进行了分离纯化吧。。就算溶液变稀了浓缩一下不就回来了嘛
20楼2012-07-19 12:33:20
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。
2楼2012-06-05 15:30:55
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4679540

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kedaxiaoyu at 2012-06-05 15:30:55
这个……根据条件试试别的柱子啊,反相,疏水等都试试,同时注意稍微改变一下条件结果可能会差很多的。

我们老师不懂,又不舍得花钱。只要是我们实验室有的我都试过了。我离子交换柱条件摸了很久,现在差不多是最好了,但是还是有杂质。反相、疏水什么的都没有。我最近在过凝胶,不行就试试硅胶了。哎~
3楼2012-06-05 20:10:29
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

大小差不多的话用凝胶很难分开吧?
4楼2012-06-06 08:28:30
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