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western blot 第一次曝光有条带,而且浓厚,第二次就没有了。。。
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lengol
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虫号: 1086225
[交流]
western blot 第一次曝光有条带,而且浓厚,第二次就没有了。。。
最近一直被这鬼东西所苦恼,就是孵了一抗二抗之后,第一次b-actin曝光条带还算可以,但是第二次曝光就没结果了,因为我的目的蛋白没有显影出来,所以想多曝光一会儿可以让他出来。但是第二次却啥都没有了,或者就是很浅。我尝试过将上样量变大,浓度是0.8,用的30ul,35ul,40ul,50ul,后来连b-catin都没了。。
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2012-06-04 12:40:58
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lengol
新虫
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虫号: 1086225
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9楼
:
Originally posted by
废哥117
at 2012-06-05 15:41:55
目的蛋白你加了AB液后黑暗中观察有没有荧光出现?如果没有的话,很多情况下压再长时间你都不会出来。
这个还真没有,但是有时候目的蛋白压的时间长了之后就能出现条带,而且较为清晰。但是有时候又没有,条件没有改变,总觉得很不稳定
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10楼
2012-06-05 17:36:51
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yuyelin
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★ ★ ★ ★ ★
lengol(金币+1): 谢谢参与
silicare: 金币+3, 应助指数+1, 同问
2012-06-04 15:27:44
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖!
2012-06-05 08:16:37
你曝光时间多长?时间太长的话,荧光会变弱,消失的。
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2楼
2012-06-04 15:13:42
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啊Q精神
木虫
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虫号: 1491245
★
lengol(金币+1): 谢谢参与
显色液不行了,荧光衰减了,国产的也就最多半小时。
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3楼
2012-06-04 19:55:58
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cfynocry
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虫号: 1436077
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我觉得吧曝光时间是不能太长的哈,
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4楼
2012-06-05 08:44:07
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