| 查看: 1553 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
求原核表达诱导表达具体操作？？？
|
||
| 我选择的PET32a，把我差不多600bp的目的片段连入了pet32a。转化入表达菌株Rosset。下一步就是要做诱导表达了！可是我从来都没做过，还是有好多的细节不清楚啊！惶恐，求高人指点！我看别人的文章里用到1XPBS，2XSDS，不知道1XPBS和2XSDS的配方是怎样的？？Sample Text因为是差不多600bp，所以我的目的蛋白应该是21KD左右。不知道选择PET32a载体，前面是否会多编码一段蛋白啊？我的目的序列是从ATG开始的！我应该选择分离胶和浓缩胶的浓度各是多大喃？在SDS-PAGE过程中，缓冲液用的是什么啊？什么样的配方啊？我应该怎样安排对照比较好喃？有什么特别要注意的么？求高人指点！ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有96人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 国家蛋白质科学中心（上海）（筹）招聘启事
已经有3人回复
- 【资料】studier的自动诱导系统---原核诱导表达蛋白，无需IPTG
已经有125人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 【求助/交流】原核表达 诱导时间的长短影不影响蛋白的活性啊？
已经有6人回复
- 【专题】蛋白新纯化思路探讨
已经有26人回复
- 【求助/交流】原核pET系统低温诱导表达菌体浓度太小怎么办？
已经有7人回复
- 微生物学考研资料1(沈萍版同步）免币分享
已经有67人回复
6楼2012-06-04 16:30:50
roomofxw
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 13 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2882.1
- 散金: 69
- 红花: 7
- 帖子: 755
- 在线: 1020小时
- 虫号: 812203
- 注册: 2009-07-20
- 专业: 生物化学
4楼2012-06-04 13:20:06
5楼2012-06-04 14:48:26
roomofxw
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 13 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2882.1
- 散金: 69
- 红花: 7
- 帖子: 755
- 在线: 1020小时
- 虫号: 812203
- 注册: 2009-07-20
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
草帽小子: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢，有问题再请教！ 2012-06-04 16:52:39
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-07 13:44:44
草帽小子: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢，有问题再请教！ 2012-06-04 16:52:39
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-07 13:44:44
|
http://biotech.ou.edu/ 是预测可溶概率的，当然只是概率 首先看文献啊，别人做过或者类似蛋白是不是包涵体 然后就是跑电泳的时候啊，你跑的全菌，破菌上清，和破菌沉淀里面，目的条带在沉淀里面的，只要不是破菌没破开，那就是包涵体了 |
7楼2012-06-04 16:37:00
5