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shengnan1987铁虫 (初入文坛)
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带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
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我做的是一种蛋白酶的原核表达,c端带一个his标签,大小31kd,等电点10,pet24a可溶表达,但表达量不高,不到50%,用镍柱纯化,Binding: 20 mM sodium phosphate, 20 mM Imidazole,500 mM NaCl, PH 8.0 Elution: 20 mM sodium phosphate, 500 mM Imidazole, 500 mM NaCl, PH8.0 调整咪唑的浓度,要么峰型好,但杂带还是很多;要么没有特异的峰出现。请问各位高手有没有好的纯化方法?非常感谢 |
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shengnan1987
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12楼2012-06-27 22:57:25
孙启亮
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2楼2012-05-27 18:39:39
shengnan1987
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