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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于原核分泌表达
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

[求助] 关于原核分泌表达

在目的基因前段前连上大肠杆菌碱性磷酸酶的信号肽Pho A，并把这重组片段连接到PET28a上，可否能实现大肠杆菌的分泌表达？
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1楼 2012-05-21 18:34:22
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜: 金币+2, 专家考核, 专家很热心~ 2012-05-22 08:31:28
引用回帖:
3楼: Originally posted by viki_MDK at 2012-05-21 20:37:55:
pho A因该是分泌到周质中的吧，不是到培养基中的吧。

pho A如果是分泌到周质的信号肽，那成功几率比较大。
pho A信号肽没用过，我们一般用pET20的pel B和pET39中的信号肽，但也不能百分之一百分泌到周质。
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4楼2012-05-21 21:21:38
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-05-22 08:31:11
viki_MDK: 金币+3 2012-05-25 18:41:58
不一定的，有信号肽有分泌表达的可能性，但在大肠杆菌中带信号肽后不能分泌表达的例子也很多的。
现在大肠杆菌的分泌表达一般是分泌到周质空间，成功分泌到胞外的例子很少的。
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2楼2012-05-21 20:10:57
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viki_MDK

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-05-21 20:10:57:
不一定的，有信号肽有分泌表达的可能性，但在大肠杆菌中带信号肽后不能分泌表达的例子也很多的。
现在大肠杆菌的分泌表达一般是分泌到周质空间，成功分泌到胞外的例子很少的。

pho A因该是分泌到周质中的吧，不是到培养基中的吧。
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3楼2012-05-21 20:37:55
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ing搁浅

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大量培养，再用条件筛选啊，应该有表达的
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一起努力奋斗
5楼2012-05-22 00:26:51
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