| 查看: 7817 | 回复: 58 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
黄孢子原毛平革菌木素过氧化物酶，锰过氧化物酶，漆酶酶活测定
|
||||
|
我用的方法如下： 木素过氧化物酶（LiP）测定：取 0.2mL 藜芦醇溶液（10mmol•L-1）、0.4mL 酒石酸缓冲液（250mmol•L-1，pH=3.0）与 0.4mL 粗酶液混匀，即得 1mL 反应液。在 30℃下，于反应液中加 20μLH2O2溶液（20mmol•L-1）启动酶促反应，以未加启动因子的反应液为参比，用紫外分光光度计（UV-2550）测定 310nm 处 2min 前后反应液吸光度的变化。一个酶活力单位（U）定义为每分钟氧化藜芦醇产生 1μmol藜芦醛所需的酶量。 锰过氧化物酶（MnP）测定：将 0.2113g MnSO4溶解于 1L 酒石酸缓冲液（50mmol•L-1，pH=4.5）中，取 0.8mL 该溶液同 0.2mL 粗酶液混匀，即得 1mL 反应液。在 30℃下，于反应液中加 20μLH2O2溶液（20mmol•L-1）启动酶促反应，以未加启动因子的反应液为参比，用紫外分光光度计（UV-2550）测定 290nm 处2min 前后反应液吸光度的变化。一个酶活力单位（U）定义为每分钟氧化 Mn2+产生 1μmol Mn3+所需的酶量。 漆酶采用ABTS法 但测出吸光度是负值，请大家帮忙分析一下并提出宝贵意见，还有不解的是怎么把吸光度的变化转化为酶活，还有就是测定2min钟前后的吸光度变化，这两分钟怎么选取，随便选取两分钟即可吗，或者大家有没有测这几种酶的具体方法，能否分享一下，拜托各位了！ [ Last edited by fanxiaojuan on 2012-5-17 at 17:05 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 油漆检测问题！！！
已经有5人回复
- Mn2+的水和离子为什么无色？
已经有6人回复
- 酶活测定中的缓冲液
已经有4人回复
- 过氧化氢酶测定
已经有3人回复
- 酶活测定时，缓冲溶液配制
已经有3人回复
- 参比液的吸光度在变化该怎么办？
已经有5人回复
- 在生物实验中使用辣根过氧化物酶，请问没反应，是怎么回事？
已经有4人回复
- 黄孢原毛平革菌培养基的配方问题
已经有5人回复
- ABTS法测漆酶活性
已经有5人回复
- 植物山茶过氧化氢酶（CAT）活性测定问题
已经有24人回复
- 关于乙酸-乙酸钠缓冲溶液的一个问题
已经有10人回复
- 有关酶活测定的pH
已经有6人回复
- 漆酶如何保存酶活
已经有6人回复
- 【资料】漆酶与生物漂白
已经有9人回复
- 漆酶酶活定义方法
已经有10人回复
- 漆酶对木质素的作用
已经有3人回复
- 求测定过漆酶、木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的方法
已经有25人回复
- CAT或POD过氧化氢酶和过氧化物酶的单位是什么？
已经有7人回复
- 分光光度计测定酶活中的问题
已经有9人回复
- 第9届世界生物材料大会重要通知，Important Notice--9TH WBC
已经有7人回复
- 反应器中的CO2如何收集，而又不会导致反应器内微生物缺氧～
已经有6人回复
- 内蒙古大学研究生 微生物专业 每年考的专业课一样吗？具体是哪几本书？
已经有26人回复
- 内蒙古大学的微生物专业好不好？其分子免疫学主要研究什么呀？
已经有12人回复
- 【求助】半衰期230度1分钟左右的过氧化物硫化剂有哪些呀？
已经有4人回复
- 【求助/交流】孢子怎么保种?
已经有4人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
2026年材料结构与力学性能国际会议（MSMP 2026
+1/875
-
2026年物理学、化学与数据分析国际会议 (PCDA 2026)
+1/858
-
2027年航天航空、材料与人工智能国际会议（AMAI 2027）
+1/839
-
2027年电气工程、自动化与应用工程国际会议（EEAE 2027）
+1/825
-
坐标深圳湖北男寻搭子，户外美食情感随缘
+3/189
-
香港中文大学（深圳）靳羽华教授交叉实验室高薪诚聘博士后（光致变色，光响应材料方向
+3/146
-
《阿飞和他的那个女人》 —— 第四章
+1/90
-
南科大薛亚辉课题组诚聘离子输运、二维材料、原子力显微镜等方向“快响行动”博士生
+1/77
-
南方科技大学力航系急招收纳米材料、力学、机械等方向推免硕士研究生两名
+1/70
-
同济大学环境学院肖倩课题组招收博士研究生（资格审核制）
+1/42
-
哈工大（深圳）何自开团队诚招2027级化学工程与技术专业博士生
+1/36
-
宁波大学海运学院招电催化直博生
+1/28
-
北京理工大学集成电路与电子学院招聘 | 副研究员 | 博士后 | 科研助理
+1/16
-
北京理工大学集成电路与电子学院招聘 | 副研究员 | 博士后 | 科研助理
+1/13
-
废油资源化教育部工程中心 诚聘催化方向特聘研究员
+1/10
-
大湾区大学姚瑶课题组2027届博士生招生 （与中山大学联合培养）
+1/6
-
电子科技大学基础与前沿研究院招「AI4Science」和多铁材料方向博士后
+1/6
-
【2027硕士招生】招收材料、化工、环境、冶金类硕士研究生
+1/5
-
澳门大学光电方向招收博士研究生
+1/3
-
吉林大学大学化学学院介电高分子课题组招收2027级博士生/硕士生
+1/2
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
fanxiaojuan: 金币+2, 好的，谢谢哦 2012-05-19 18:18:23
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
fanxiaojuan: 金币+2, 好的，谢谢哦 2012-05-19 18:18:23
|
我们实验室常用的方法，这是师姐论文上用的。我还没有做过，具体操作部是很清楚，不过听说这东西测出来参差不齐的，兄台好好摸索吧，祝你成功，相互交流。 1.漆酶(Lac)活性的测定 于0.05mol/LpH4.0的醋酸缓冲液3.5ml中，加入3.36mmol/L的邻联甲苯胺0.5ml(95%的乙醇溶液)，再加入稀释50倍的酶液0.5ml，30℃反应3min后于600nm处比色测定。酶定义为每分钟每毫升使OD600值改变0.001为一个酶活力单位。 2.木质素过氧化物酶(Lip)活性的测定 亚甲基蓝法:0.1ml的1.2mmol/L的亚甲基蓝，0.6ml的0.5mol/L的酒石酸钠缓冲成分，（PH4.0），2.2ml稀释50倍的酶液，加0.1ml的2.7mmol/的H2O2启动反应。酶定义为每分钟每毫升使OD664值改变0.001为一个酶活力单位。 |
37楼2012-05-19 17:25:44
13楼2012-05-17 19:05:12
闲来逛逛……14楼2012-05-17 19:09:05
简单回复
2012-05-17 18:49
回复
fanxiaojuan(金币+1): 谢谢参与
86739294910楼
2012-05-17 18:54
回复
