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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC使用缓冲盐后如何冲柱
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倦怠阴天

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC使用缓冲盐后如何冲柱

流动相：甲醇-0.1%磷酸（三乙胺调PH至6）=60:40
使用的是C18柱，由于液相接触不是很多，听说使用缓冲盐对柱子影响比较大，想请教一下大家，如何冲柱才能尽量减少缓冲盐对柱子的损坏
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1楼 2012-05-16 13:49:28
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lijin79833

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢应助 2012-05-18 13:32:21
用甲醇：水60：40冲洗就可以，至少30倍柱体积。
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用心做好药
3楼2012-05-16 14:15:37
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-16 14:52:17
先水相大比例冲，再换成有机相大比例冲，主要是防止缓冲盐在柱子中析出。对柱子损伤较大的是离子对试剂。你这个流动相三乙胺用量很小，基本上对柱子没什么损害的。
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1234
2楼2012-05-16 13:56:44
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-16 14:52:31
磷酸盐容易堵柱子和仪器。柱我们一般是用10%甲醇－水冲一小时后再用甲醇冲半小时。
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4楼2012-05-16 14:50:59
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女巫的小木屋

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流，但是用乙腈的话，成本就上去了啊~~~ 2012-05-16 15:49:56
我的方法：90%水-10%乙腈，冲1个小时;
                70%水-30%乙腈，冲10分钟；
           30%水-70%乙腈，冲10分钟；
           10%水-90%乙腈，冲30分钟
仅供借鉴
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5楼2012-05-16 14:56:00
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