| 查看: 2447 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
thestormcong银虫 (小有名气)
|
[求助]
酶活测定
|
||
|
大家好！小弟现在想测我自己从胞内裂解出来的粗酶液的酶活。可是不知道如何确定底物和酶的量，是不是底物要过量？我是用分光光度计测定产物生成量来计算酶活的。怎么样摸索这个量呢？还有消光系数跟OD值和酶有什么关系呢？ 小弟接触酶学不久，还有很多不清楚的地方，希望得到有经验的虫友的帮助，非常感谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 基因工程、分子技术、微生物理论 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有90人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - MolEPI: 3
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
5楼2012-05-14 03:11:12
crazymouse66
金虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 3657.7
- 散金: 140
- 红花: 4
- 帖子: 551
- 在线: 112.6小时
- 虫号: 1441792
- 注册: 2011-10-14
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-14 13:44:35
thestormcong: 金币+3, ★有帮助 2012-05-14 18:38:55
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-14 13:44:35
thestormcong: 金币+3, ★有帮助 2012-05-14 18:38:55
| 这个底物和酶的量是要不断摸索的。在你把反应体系加进去后测相应吸光值的变化，那时你要看你吸光值的变化，若反应过快，你则要调整酶和底物的量，此时你找到一个适合的量。测吸光值的变化时的时间间隔也是要自己摸索的，比如十秒测一个值，测十个值。然后你用时间间隔和相应的OD值做一条直线，此时的斜率就是你要的值。因为规定的是OD值每变化0.01为一个酶活单位,所以你此时的斜率还要乘以100，再除以你测的可溶性蛋白的量，就是你要的酶活了。单位是U/mg protein |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
thestormcong3楼2012-05-13 23:52:08
sosako
金虫 (著名写手)
- 应助: 86 (初中生)
- 金币: 1016.2
- 红花: 3
- 帖子: 1133
- 在线: 43.4小时
- 虫号: 855904
- 注册: 2009-09-24
- 性别: GG
- 专业: 药剂学
4楼2012-05-13 23:53:05
shenlin0514
木虫 (正式写手)
无名小虫
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 3197.3
- 散金: 897
- 红花: 3
- 帖子: 810
- 在线: 100.3小时
- 虫号: 299250
- 注册: 2006-11-25
- 性别: GG
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
6楼2012-05-14 10:28:15
投票:
10