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真菌转化技术--PCR获取线性化片段和限制性内切酶获取线性化片段的区别?
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木虫
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(高中生)
金币: 4273
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虫号: 67494
[交流]
真菌转化技术--PCR获取线性化片段和限制性内切酶获取线性化片段的区别?
想了解一下真菌,特别是丝状真菌的转化,有直接用质粒的,也有限制性内切酶介导的,还有线性化片段的(包括酶切和PCR)。有看到说限制性内切酶介导法比质粒直接转化效率高几倍,想知道高重复性转化的效率哪种更高,觉得PCR法更简单,求两种线性化片段转化原理上的区别。
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2012-05-13 22:14:32
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爱莫若月
木虫
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547star(金币+1): 谢谢参与
楼主有转化的载体吗
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9楼
2012-06-09 23:09:58
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liufuliang
新虫
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虫号: 98678
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
547star(金币+1): 谢谢参与
547star: 金币+3, 3S
2012-05-13 23:29:39
547star: 金币+7, 农杆菌据文献报道是不错,但是菌和载体难找啊。宝生物的据说不好用。
2012-05-25 17:12:39
建议你查农杆菌介导的方法。该方法成功率高。建库后,多拷贝低,后续的反向克隆基因更简单。
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2楼
2012-05-13 22:25:28
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克隆大虾
铁杆木虫
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547star(金币+1): 谢谢参与
547star: 金币+5, 3s
2012-05-15 19:29:09
限制性内切酶介导法与质粒直接转化效率大同小异,关键在于原生质体的质量。PCR片段直接转化效果还是不错的...
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5楼
2012-05-15 19:12:05
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userhung
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虫号: 119626
★ ★ ★ ★ ★ ★
547star(金币+1): 谢谢参与
547star: 金币+5, 辛苦了
2012-05-15 21:13:41
http://wenku.baidu.com/view/d19b93244b35eefdc8d3334e.html
http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10434-2007135480.htm
http://www.doc88.com/p-54389919102.html
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-HHGZ200707011.htm
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8楼
2012-05-15 19:37:52
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