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604540357

金虫 (小有名气)


[交流] 怎样准确建立总黄酮的检测方法?

本人最近提取植物总黄酮,其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》,以芦丁作标样建立标准曲线: 精密称取芦丁25mg ,加甲醇定容至25 ml ,取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml,加含5 % NaNO2 水溶液1ml ,摇匀静置6 min ,再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ,摇匀静置6 min,再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ,用蒸馏水稀释定容至刻度,摇匀静置16 min,在480~540 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长在508 nm处,得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
    但是最后经过萃取和树脂纯化后,检测结果120%以上,试过很多次,都是100%以上,请问各位高人指点一二!!!!!
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wangli-

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我可以弱弱的说一句这个方法是不科学的吗?标曲是芦丁,总黄酮里却不只是芦丁,难道槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物的最大吸收波长都在508nm吗?我觉得不合理。还有就是显色时间,待测物质的浓度(线性范围)需要注意。待测溶液颜色不能太深,要接近标曲时芦丁溶液浓度,溶液要澄清透亮,否则结果会偏大。尽量用石英吧。我做过总黄酮和多糖(混合物)测定,重现性很不好。
34楼2013-11-26 21:44:00
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qiute621

铜虫 (著名写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
换换其他显色的方法
2楼2012-05-10 17:51:25
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biology-jlu

木虫之王 (文坛精英)



604540357(金币+1): 谢谢参与
纯度超过100了?不会吧?
5楼2012-05-10 18:17:34
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zoupeng2046

金虫 (正式写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
谢谢楼主!
7楼2012-05-10 18:27:38
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