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怎样准确建立总黄酮的检测方法?
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金虫
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应助: 2
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帖子: 92
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虫号: 984881
[交流]
怎样准确建立总黄酮的检测方法?
本人最近提取植物总黄酮,其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》,以芦丁作标样建立标准曲线: 精密称取芦丁25mg ,加甲醇定容至25 ml ,取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml,加含5 % NaNO2 水溶液1ml ,摇匀静置6 min ,再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ,摇匀静置6 min,再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ,用蒸馏水稀释定容至刻度,摇匀静置16 min,在480~540 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长在508 nm处,得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
但是最后经过萃取和树脂纯化后,检测结果120%以上,试过很多次,都是100%以上,请问各位高人指点一二!!!!!
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zhangxiangyu
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q
2012-05-26 19:11:45
对于您的问题,个人认为有可能是几个方面的原因
1、实验仪器可能有问题,建议检查或者做空白看看。
2、对于您说的纯化后达到120%,不知道您是怎么算的,是否计算有误?
4、芦丁表样是否有问题?
5、一般如果相隔时间比较长的话,您的标准曲线建议重新做。
6、显色剂的选择不对也有可能出现问题。
建议各个排除后解决问题。
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23楼
2012-05-13 19:27:11
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qiute621
铜虫
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换换其他显色的方法
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2012-05-10 17:51:25
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biology-jlu
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纯度超过100了?不会吧?
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5楼
2012-05-10 18:17:34
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zoupeng2046
金虫
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7楼
2012-05-10 18:27:38
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