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604540357

金虫 (小有名气)

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[交流] 怎样准确建立总黄酮的检测方法？

本人最近提取植物总黄酮，其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》，以芦丁作标样建立标准曲线：精密称取芦丁25mg ，加甲醇定容至25 ml ，取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml，加含5 % NaNO2 水溶液1ml ，摇匀静置6 min ，再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ，摇匀静置6 min，再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ，用蒸馏水稀释定容至刻度，摇匀静置16 min，在480～540 nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长在508 nm处，得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
但是最后经过萃取和树脂纯化后，检测结果120%以上，试过很多次，都是100%以上，请问各位高人指点一二！！！！！

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小胡0905

yiwenbin

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1楼 2012-05-10 17:45:46

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zhangxiangyu

金虫 (小有名气)

应助: 29 (小学生)
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虫号: 926732

★ ★
604540357(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-26 19:11:45

对于您的问题，个人认为有可能是几个方面的原因
1、实验仪器可能有问题，建议检查或者做空白看看。
2、对于您说的纯化后达到120%，不知道您是怎么算的，是否计算有误？
4、芦丁表样是否有问题？
5、一般如果相隔时间比较长的话，您的标准曲线建议重新做。
6、显色剂的选择不对也有可能出现问题。
建议各个排除后解决问题。