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604540357

金虫 (小有名气)


[交流] 怎样准确建立总黄酮的检测方法?

本人最近提取植物总黄酮,其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》,以芦丁作标样建立标准曲线: 精密称取芦丁25mg ,加甲醇定容至25 ml ,取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml,加含5 % NaNO2 水溶液1ml ,摇匀静置6 min ,再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ,摇匀静置6 min,再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ,用蒸馏水稀释定容至刻度,摇匀静置16 min,在480~540 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长在508 nm处,得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
    但是最后经过萃取和树脂纯化后,检测结果120%以上,试过很多次,都是100%以上,请问各位高人指点一二!!!!!
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qiute621

铜虫 (著名写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
换换其他显色的方法
2楼2012-05-10 17:51:25
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biology-jlu

木虫之王 (文坛精英)



604540357(金币+1): 谢谢参与
纯度超过100了?不会吧?
5楼2012-05-10 18:17:34
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zoupeng2046

金虫 (正式写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
谢谢楼主!
7楼2012-05-10 18:27:38
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yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)



604540357(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
8楼2012-05-10 18:40:10
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抗氧剂

银虫 (正式写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
瞅瞅
9楼2012-05-10 19:04:29
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顶贴少女

金虫 (著名写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
添人气的!
10楼2012-05-10 19:07:50
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yangy1220

新虫 (职业作家)



604540357(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主
13楼2012-05-10 19:27:37
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啄虫鸟

新虫 (著名写手)



604540357(金币+1): 谢谢参与
顶贴!
14楼2012-05-10 19:42:47
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soyjle

铁虫 (小有名气)


★ ★
604540357(金币+1): 谢谢参与
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-11 14:10:08
多酚、酚酸类物质对测定有影响,可以尝试其他方法。
参考文献:
1.周春华,  孙崇德, 李鲜. 富含绿原酸的植物中类黄酮测定方法探讨. 植物生理学通讯,2007, 43(5): 902-904
2.何书美,刘敬兰. 茶叶中总黄酮含量测定方法的研究. 分析化学, 2007, 35(9): 1365-1368
15楼2012-05-11 09:14:16
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小胡0905

银虫 (小有名气)


★ ★
604540357(金币+1): 谢谢参与
送鲜花一朵
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-11 14:09:57
亚硝酸钠-硝酸铝显色法测总黄酮是常用方法!
建议:1、溶液过滤后再测吸光度
      2、换用其它更为专属的显色方法来测含量,多查些文献
16楼2012-05-11 09:26:12
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604540357

金虫 (小有名气)


引用回帖:
15楼: Originally posted by soyjle at 2012-05-11 09:14:16:
多酚、酚酸类物质对测定有影响,可以尝试其他方法。
参考文献:
1.周春华,  孙崇德, 李鲜. 富含绿原酸的植物中类黄酮测定方法探讨. 植物生理学通讯,2007, 43(5): 902-904
2.何书美,刘敬兰. 茶叶中总黄酮含量测 ...

谢谢 指点我看一下
18楼2012-05-11 13:54:46
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604540357

金虫 (小有名气)


引用回帖:
16楼: Originally posted by 小胡0905 at 2012-05-11 09:26:12:
亚硝酸钠-硝酸铝显色法测总黄酮是常用方法!
建议:1、溶液过滤后再测吸光度
      2、换用其它更为专属的显色方法来测含量,多查些文献

亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法就是国标方法啊  我怀疑还是跟总黄酮中的成分有关系
19楼2012-05-11 13:56:17
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xian2008

铜虫 (小有名气)



604540357(金币+1): 谢谢参与
由于样品未经分离纯化,样品中含有大量的原花色素等酚类物质干扰,该定量测定方法误差较大。建议换其他方法检测,例如,氯化铝-醋酸钾显色方法。
20楼2012-05-11 14:36:59
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fenghaiyan82

木虫 (正式写手)


★ ★
604540357(金币+1): 谢谢参与
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-05-14 09:41:00
建议使用AlCl3显色体系,以HAc-NaAc为缓冲溶液。
Al(NO3)3显色法,干扰物质较多。
21楼2012-05-11 15:06:53
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604540357

金虫 (小有名气)


引用回帖:
21楼: Originally posted by fenghaiyan82 at 2012-05-11 15:06:53:
建议使用AlCl3显色体系,以HAc-NaAc为缓冲溶液。
Al(NO3)3显色法,干扰物质较多。

嗯 也我试试   谢谢你    你能不能告诉我  具体的原理 啊
22楼2012-05-12 13:53:45
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zhangxiangyu

金虫 (小有名气)


★ ★
604540357(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-26 19:11:45
对于您的问题,个人认为有可能是几个方面的原因
   1、实验仪器可能有问题,建议检查或者做空白看看。
   2、对于您说的纯化后达到120%,不知道您是怎么算的,是否计算有误?
   4、芦丁表样是否有问题?
   5、一般如果相隔时间比较长的话,您的标准曲线建议重新做。
   6、显色剂的选择不对也有可能出现问题。
建议各个排除后解决问题。
23楼2012-05-13 19:27:11
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yiwenbin

禁虫 (正式写手)

★ ★
604540357(金币+1): 谢谢参与
送鲜花一朵
xiaoxiao270: 金币+1, 3q 2012-05-26 19:11:52
本帖内容被屏蔽

24楼2012-05-13 23:07:42
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sunjian于

铜虫 (小有名气)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+1, 3q 2012-05-26 19:11:58
标准液的配制是不是有问题啊
25楼2012-05-19 15:18:16
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604540357

金虫 (小有名气)


引用回帖:
20楼: Originally posted by xian2008 at 2012-05-11 14:36:59
由于样品未经分离纯化,样品中含有大量的原花色素等酚类物质干扰,该定量测定方法误差较大。建议换其他方法检测,例如,氯化铝-醋酸钾显色方法。

你有氯化铝-醋酸钾显色方法的具体步骤吗?
26楼2012-05-25 15:18:24
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liushun0728

铁虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
按照药典的方法试试。。。
27楼2012-05-25 16:00:27
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lrbdtc

银虫 (小有名气)


果断质谱了
28楼2012-05-25 16:34:17
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cll868

至尊木虫 (著名写手)


我以前也是这么做得啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
29楼2012-05-25 23:11:37
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slshihao

木虫 (小有名气)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-26 19:12:07
标曲相关系数多少,有超过其线性范围吗
30楼2012-05-26 10:23:22
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604540357

金虫 (小有名气)


引用回帖:
30楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-26 10:23:22
标曲相关系数多少,有超过其线性范围吗

R=0.9992   A在0.2-0.86之间啊   我打算换方法试试
31楼2012-05-30 23:41:45
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yilishanshan

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多找些文献,再研究下
最近我也在做总黄酮,头痛呀,这个东西太粗了,影响因素太多,我就连对照品都还没选好,芦丁不行呀!
32楼2012-05-30 23:52:40
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liugod0814

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也碰到了............感觉总黄酮的这些检测方法都太粗了
33楼2013-11-25 20:24:22
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wangli-

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我可以弱弱的说一句这个方法是不科学的吗?标曲是芦丁,总黄酮里却不只是芦丁,难道槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物的最大吸收波长都在508nm吗?我觉得不合理。还有就是显色时间,待测物质的浓度(线性范围)需要注意。待测溶液颜色不能太深,要接近标曲时芦丁溶液浓度,溶液要澄清透亮,否则结果会偏大。尽量用石英吧。我做过总黄酮和多糖(混合物)测定,重现性很不好。
34楼2013-11-26 21:44:00
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wangli-

新虫 (初入文坛)


芦丁标曲不难做,关键是样品处理。
35楼2013-11-26 21:45:16
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wang95278729

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想问楼主最终如何解决的问题
36楼2015-08-18 14:25:28
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215627

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想问楼主怎么解决的问题 ,我现在也遇到了这样的问题
37楼2018-05-27 15:51:13
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xachenxi3楼
2012-05-10 17:52   回复  
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2012-05-10 18:03   回复  
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2012-05-10 18:19   回复  
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bestyqs11楼
2012-05-10 19:17   回复  
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wlxwlx102612楼
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83996778117楼
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