[交流] 跑植物叶片蛋白的双向电泳需要点Mark吗多大分子量的啊还有多大的胶条可以啊

要做植物叶片的双向电泳不知道跑二向的时候要不要一定要点Mark 呢求各位高手指教以及选多大长度的胶条可以啊有没有跑这个电泳的给个配胶的配方好不

回复此楼

» 猜你喜欢

依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。已经有14人回复
表哥与省会女结婚，父母去帮带孩子被省会女气回家生重病了已经有11人回复
江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后已经有3人回复
AI 太可怕了，写基金时，提出想法，直接生成的文字比自己想得深远，还有科学性已经有11人回复
同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗已经有10人回复
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。已经有11人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

5 RACE inner-PCR电泳结果无条带，是怎么回事？已经有4人回复
重组质粒酶切的电泳图已经有6人回复
双向电泳，等电聚焦后，胶条酸端，总是能看到白色蛋白，这该怎么解决啊？？？？已经有6人回复
这样的电泳图片是否代表PCR扩增成功了？已经有26人回复
rt-pcr电泳图，求好心虫友帮助分析一下，跪谢。。。已经有14人回复
双向电泳，溴酚蓝需要过滤吗？已经有11人回复
我想从油滴中富集分泌出的蛋白质，已达到做双向电泳所需的上样量，有什么方法？谢谢。已经有5人回复
双向电泳，蛋白样品除盐有用透析的吗？好操作吗？已经有8人回复
双向电泳，蛋白定量测定用方法的讨论已经有14人回复
双向电泳里，蛋白酶抑制剂要不要加EDTA呢？已经有8人回复
双向电泳，刚提出来的总蛋白，在裂解液里可以4度放多久啊？已经有12人回复
双向电泳提总蛋白，如何除盐啊？已经有10人回复
双向电泳，TCA丙酮沉淀体总蛋白，干燥多久，溶解多久啊？已经有5人回复
双向电泳的胶条，跑后挤出来，就分不清碱性端和酸性端了，请大侠们给点建议已经有4人回复
双向电泳蛋白纯化已经有6人回复
一般蛋白marker上样，需要100度煮沸5分钟，双向电泳上样蛋白样品是否需要煮沸呢？？已经有6人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2012-05-09 09:40:21

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖置顶 ( 共有1个 )

boyuanbio

捐助贵宾 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 287.7
帖子: 46
在线: 26.7小时
虫号: 1888193

★
樱桃敏敏(金币+1): 谢谢参与

如果你想知道蛋白分布的分子量情况的话可以加Mark，如果的目的是进行差异比较，后续做质谱鉴定的话，就可以不加的，胶条的长度选择是根据你所要分离的蛋白的决定的，我们一般选择24cm的，用12%的分离胶
12%的凝胶（每块胶约65ml，做一次凝胶需要浪费的体积大约是30ml）
试剂 160 ml（2块） 225 ml（3块） 290 ml（4块） 355 ml（5块） 420 ml（6块）
30%Acr/Bis（37.5：1）（ml） 64 90 116 142 168
超纯水（ml） 54 76 98 120 142
1.5 M Tris-HCL（pH8.8）（ml） 40 56 72.4 89 105
10% SDS （ml） 1.6 2.3 2.9 3.6 4.2
10%AP（ul） 800 1130 1450 1780 2100
TEMED（ul） 80 113 145 178 210

赞一下

回复此楼

21楼2012-08-02 14:40:16

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zero623

荣誉版主 (职业作家)

应助: 102 (高中生)
贵宾: 5.242
金币: 4760.8
帖子: 4293
在线: 1116.9小时
虫号: 109989

★
樱桃敏敏(金币+1): 谢谢参与

我来回答你的问题：
1. markers还是需要的，要不然无法确定分离后的蛋白大小范围！条件实验是可以不加，但是最后论文上要用的图最好还是要用！

2. IPG胶条的长度越长越好（主要与后续SDS-PAGE电泳槽兼容），这样不同PH梯度之间隔大有利于聚焦；

3. 2DE的PROTOCOL非常多，建议查阅一些专业书籍，比如Simpson的《Proteins and proteomics: a laboratory manual》!

赞一下

回复此楼

7楼2012-05-09 10:10:19

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

haixing2008

荣誉版主 (文坛精英)

★
樱桃敏敏(金币+1): 谢谢参与

不懂帮顶！

回复此楼

8楼2012-05-09 10:19:13

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

樱桃敏敏

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 118.8
帖子: 82
在线: 17.5小时
虫号: 1235010

引用回帖:

7楼: Originally posted by zero623 at 2012-05-09 10:10:19:
我来回答你的问题：
1. markers还是需要的，要不然无法确定分离后的蛋白大小范围！条件实验是可以不加，但是最后论文上要用的图最好还是要用！

2. IPG胶条的长度越长越好（主要与后续SDS-PAGE电泳槽兼容），这 ...

好的非常感谢您我找找看呵呵马上就要做实验了还得好好找找呢以后还有问题请假您哦谢谢您