| 查看: 5419 | 回复: 7 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
组织块贴壁法培养细胞如何做？
|
||
|
各位各位这里瞧下下哈，我是个菜鸟级别的，问一下菜鸟问题哦～那个组织块贴壁培养细胞具体是个啥子过程嘞？细胞不纯的话，怎么消化怎么传代啊？谢谢各位咯*^_^* [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
雨玫天晴» 猜你喜欢
二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores
已经有4人回复
-
OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？
已经有13人回复
-
申请科研项目纯靠实力能成功吗？
已经有7人回复
-
极限拉扯，如何抉择
已经有14人回复
-
课题组会帮你通过考核么？
已经有7人回复
-
入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍
已经有6人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 组织块法养肺癌原代过程中，细胞瓶中长出了这种东西，是污染吗？求鉴定这是什么东西
已经有12人回复
- 原代心肌细胞培养
已经有11人回复
- 铺293T细胞总是难以把握其消化程度
已经有6人回复
- 肝细胞培养问题！
已经有19人回复
- 皮肤细胞培养方法
已经有6人回复
- 如何提高细胞原代培养细胞的产量？
已经有13人回复
- 细胞培养箱问题
已经有5人回复
- 悬浮细胞从24孔板转移至培养瓶继续培养需加多少培养液？
已经有13人回复
- 细胞培养箱可否放置在外
已经有7人回复
- 急求，平滑肌细胞过夜没贴壁？什么原因
已经有3人回复
- 怎么我养的细胞容易漂？
已经有20人回复
- 怎么测定细胞的贴壁率?
已经有4人回复
- 请问贴壁细胞用什么固定液固定、固定多长时间~~
已经有6人回复
- 细胞接种密度与增殖速度有关吗？
已经有11人回复
- 如何测定叶片组织细胞的死亡程度
已经有10人回复
- 请大家帮忙介绍几位国内师德高尚、水平突出且愿意培养年轻人的的地球化学权威
已经有14人回复
- 【资料】细胞培养、电泳、ELISA、基因破碎、酵母等__invitrogen公司的实验手册
已经有157人回复
- PEG修饰聚酰胺胺（PAMAM）树枝分子来降低细胞毒性
已经有3人回复
- 我们课题组招聘，MD 模拟方面——最好精于NAMD gromacs 做生物分子模拟
已经有55人回复
- 贴壁细胞培养时为什么边缘不清
已经有12人回复
- 如何悬浮培养贴壁型的细胞？
已经有8人回复
- 前脂肪细胞培养
已经有6人回复
- 支架做体外细胞培养，什么因素诱导细胞长入？怎么表征呢？
已经有13人回复
- 原代培养中的困惑
已经有6人回复
- 【求助/交流】请问：小鼠平均每天大约吃多少克饲料？喝多小水？？？？？请虫友们帮下�
已经有3人回复
- 【求助/交流】293T细胞里面有小颗粒，细胞不贴壁，无法继续培养
已经有12人回复
- 【求助】求助法国Institut Lavoisier 的Gerard Ferey组的主页
已经有3人回复
- 【求助】如何让α-酮戊二酸变成α-酮戊二酸一钠盐
已经有4人回复
4楼2012-05-10 13:22:43
【答案】应助回帖
★ ★ ★
zhaohq1209: 金币+3, BioEPI+1, telomerase: 金币+4, 欢迎新虫！！！ 欢迎多多交流！！ 2012-05-09 09:13 2012-05-09 10:02:03
zhaohq1209: 金币+3, BioEPI+1, telomerase: 金币+4, 欢迎新虫！！！ 欢迎多多交流！！ 2012-05-09 09:13 2012-05-09 10:02:03
|
很久以前做的，做法如下： 实验所要用的工具都应灭菌消毒。首先，在实验前24h于60×15mm的培养皿内铺上血清，将铺有血清的培养皿放入细胞培养箱内。。。。。。组织取出，用PBS将其冲洗干净。将组织切割成1mm3左右的小块。在剪切过程中，可以适当的向组织上滴1～2滴培养液，以保持湿润。然后，将剪切好的组织块用眼科镊均匀铺于事先准备好的培养皿内,加入少量含20％胎牛血清的DMEM培养液，以组织块不在培养液内漂浮为宜，然后把培养皿放置在37℃培养箱内。放置2～4h后待组织小块贴附于培养皿，加入含20％胎牛血清的DMEM培养液，在37℃含5%的CO2的条件下培养，待1～2天后细胞由组织中游出，摘掉组织块并用PBS清洗培养皿去除死细胞和组织残留物，加入培养液继续培养。待培养皿中的细胞长满后用胰蛋白酶将其消化下来，转入50ml的塑料培养瓶中培养，此时的细胞我们称其为原代。。。。细胞。 至于纯化，我做的是肺的，细胞相对含量不复杂，我要的细胞含量很高，所以穿几代，就纯化得差不多了。 要是肝的，那就不好做了。。。。。 |
2楼2012-05-09 09:13:08
3楼2012-05-10 00:18:59
5楼2012-05-10 19:23:27
10
