应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近做RACE，求助！！
91/1返回列表
查看: 915  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wushuwei1104

银虫 (小有名气)

[求助] 最近做RACE，求助！！

最近在做3‘RACE，这是我用Outer primer 做PCR后的胶图，发现用Outer primer 做PCR后的胶图是这个样子的，有类似涂抹状的拖带！  后来又做的 Inner pCR  胶图如下图，请求各位RACE高手，看看这样是什么情况？能不能切胶回收？  感觉INNER PCR后条带应该很大的！！
  谢谢各位大侠了！！！

outer PCR后的条带----



Inner PCR后的胶图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
勤能补拙
1楼 2012-05-07 18:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
★
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-12 23:00:17
楼主的情况和我一样唉！我用Outer primer没有扩出目的条带，用inner primer扩出了！我感觉你的可以切胶回收。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-05-10 16:11:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xuzhu598 at 2012-05-10 16:11:55:
楼主的情况和我一样唉！我用Outer primer没有扩出目的条带，用inner primer扩出了！我感觉你的可以切胶回收。

我师兄说，条带比较小，不象3‘端的，像是非特异扩增。他说3’端至少得1000多bp！
赞一下 回复此楼
勤能补拙
3楼2012-05-10 18:45:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-12 23:00:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-10 18:45:47:
我师兄说，条带比较小，不象3‘端的，像是非特异扩增。他说3’端至少得1000多bp！

额？3‘至少得1000多bp表示不理解啊，也有很短的啊！试剂盒里面的也有扩出850bp的样本啊！
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-12 09:50:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wushuwei1104

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xuzhu598 at 2012-05-12 09:50:47:
额？3‘至少得1000多bp表示不理解啊，也有很短的啊！试剂盒里面的也有扩出850bp的样本啊！

我的要扩增的基因做过同源比对，比对显示后面至少还有1000bp的同源区域呀！！我也想是只有400多bp呀！！
赞一下 回复此楼
勤能补拙
5楼2012-05-12 10:38:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

XOooZzz

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-05-12 10:38:10:
我的要扩增的基因做过同源比对，比对显示后面至少还有1000bp的同源区域呀！！我也想是只有400多bp呀！！

同学你还没有送去测序呀....感觉都快过了一个星期了...
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-05-12 19:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-17 14:35:16
inner出来有带的，不管大小对不对，应该切胶测序一下，再说你的大小也是自己预测的对吧，反正现在测序也花不了多少钱，万一就是你要的序列呢！
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2012-05-17 10:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaofeixiayang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得是引物没设计好，楼主最好重新设计3RACE inner引物。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2012-05-17 15:40:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫

【答案】应助回帖

★
wushuwei1104: 金币+1 2012-05-20 22:14:10
3端扩增出1000bp的说法是不科学的。大小与你的目的基因和引物离polyA尾巴的距离相关的。我的也做过3RACE，扩出来400bp，5扩出来2000bp，这才是对的。另外你的引物是巢氏引物，条带应该比较特异才对。
赞一下(1人) 回复此楼
好好学习，天天向上
9楼2012-05-20 21:45:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wushuwei1104 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭