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雨帘静思

铁杆木虫 (正式写手)

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[求助] 询问培养基调pH时的问题

大家好，我做的是头孢类的发酵试验。菌种为顶头孢霉菌。
在做种子培养基的时候里面需要加入玉米浆，当调节pH的时候用氢氧化钠进行调节。可能以前没有注意，最近每次调完pH（6.5）之后培养基总是有一定量的絮状沉淀，不知道是不是正常，搅拌之后分布于培养基中，可是几分钟之后还是沉在瓶底，不知道是什么原因。
还有，在调节pH的时候氢氧化钠的浓度最好是多少？以前就是随便加的量，后来感觉这样可能会对培养基的成分产生影响。所以改为较低浓度的氢氧化钠（0.1-0.2mol/L）进行，但是这样又会使培养基的体积发生了很大的变化。
求助大家该怎么办啊？
谢谢

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1楼2012-05-06 11:38:54

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wgy2007

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

雨帘静思: 回帖置顶 2012-05-09 13:34:21

测总氮用凯氏定氮法，我们是用定氮仪测的，方法很简单，氨基氮是用甲醛滴定法测的，方法在网上应该能查到，如果查不到给我个邮箱号，我发给你。
按总氮加玉米浆干粉的计算方法：
玉米浆干粉加入的比例＝培养基中玉米浆的量×玉米浆的总氮/玉米浆干粉的总氮
按氨基氮加入玉米浆干粉的计算方法：
玉米浆干粉加入的比例＝培养基中玉米浆的量×玉米浆的氨基氮/玉米浆干粉的氨基氮
玉米浆干粉具体的加量还是要根据实验来确定。
用20-25％无菌甘油洗下孢子，即是终浓度。
一代斜面最多在4度冰箱冷藏1-2个月，时间长了会对活力产生影响。
我们使用甘油管先传一代斜面，用一代斜面传二代斜面，再接种摇瓶。一般是甘油管保藏菌种多做，现用现传，做甘油管保藏的菌种最好用克氏瓶培养，这样可以多做一些甘油管。如果是做实验不是生产用的话，可以考虑甘油管保藏的菌种直接接种摇瓶种子，我做过一种放线菌产抗生素的培养，就是直接用甘油管接种摇瓶，培养24小时后再用摇瓶种子接种摇瓶扩大培养，摇瓶种子长好后接种实验罐。
希望对你有帮助