24小时热门版块排行榜    

查看: 1399  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


[求助] 原核基因敲除抗性基因的问题

问下,我要用同源重组的方法来敲除枯草芽孢杆菌基因组中的B基因,请问用于筛选的抗性基因的Km的前面要不要带上启动子,后面要不要带上终止子,B基因前有A基因,后有C基因,原核是不只要A前面有一个启动子,B后面只要有一个终止子就可以了的?然后ABC上的核心元件成窜,中间有适当的间隔序列隔开??
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by scelab at 2012-05-04 19:08:41:
你理解有误
每个基因都有起始和终止code,和转录组不一样,你看看乳糖操纵子, mRNA合成的时候是一起的,但是每个基因还是单独表达的,不存在你的疑虑

恩,谢谢,我弄清楚了,确实要加的
5楼2012-05-04 22:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-04 20:56:46
Km要带启动子和终止子,最好是扩成3的倍数个碱基。
ABC可以成串,换成Km后也会成串的
小木虫之有关部门负责人
2楼2012-05-04 17:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by scelab at 2012-05-04 17:49:59:
Km要带启动子和终止子,最好是扩成3的倍数个碱基。
ABC可以成串,换成Km后也会成串的

谢谢您的回复,我还有些不是很明白,原核中基因组中A,B,C是不都有各自的启动子和终止子的,还是通用一套启动子和终止子?如果我的同源臂左臂带上要敲除的B基因编码框的前100个bp,翻译的时候会不会以B基因的ATG为起始,合成一个含33个氨基酸的B蛋白的序列,和一个移码的KM基因的融合蛋白,结果即使替换成功了,还是没有KM抗性呢?
3楼2012-05-04 18:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

【答案】应助回帖


zhuabachon: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-05-04 22:05:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhuabachon at 2012-05-04 18:01:25:
谢谢您的回复,我还有些不是很明白,原核中基因组中A,B,C是不都有各自的启动子和终止子的,还是通用一套启动子和终止子?如果我的同源臂左臂带上要敲除的B基因编码框的前100个bp,翻译的时候会不会以B基因的ATG ...

你理解有误
每个基因都有起始和终止code,和转录组不一样,你看看乳糖操纵子, mRNA合成的时候是一起的,但是每个基因还是单独表达的,不存在你的疑虑
小木虫之有关部门负责人
4楼2012-05-04 19:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +8 ziyangfang 2026-08-25 11/550 2026-09-01 09:51 by zzuzxg
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+3 Tsingking1 2026-08-27 14/700 2026-09-01 08:29 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
请填处理意见