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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 提基因组的时候做第一次PCR效果很好，但是直接以PCR产物做第二次PCR的模版后...

直接以PCR产物做第二次PCR的模版后，引物二聚体增加很多，也有目的条带出来，另外PCR体系的组分未变
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1楼 2012-05-02 22:10:50
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fwks3518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-03 13:59:09
关于二次PCR效果极差的问题，之前版块里有过很多讨论，我也曾困惑于二次PCR的结果。所以一般不鼓励二次pCR，如果需要的产物比较多，就第一次扩增的时候多扩增一些。如果非要二次PCR，建议使用巢式PCR，效果会好一些，也比较麻烦一些。
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6楼2012-05-03 09:17:10
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你回收的PCR产物再做模板加的量是不是太多了？
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未来不是梦
2楼2012-05-02 22:23:10
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-02 22:23:10:
你回收的PCR产物再做模板加的量是不是太多了？

模版量多还是别的东西多？
是直接以PCR产物做模版，不是回收琼脂糖胶上的PCR产物
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3楼2012-05-02 22:36:05
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR产物一般都要稀释的，太浓了反而不容易做好。
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4楼2012-05-02 23:25:40
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