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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 提基因组的时候做第一次PCR效果很好,但是直接以PCR产物做第二次PCR的模版后...

直接以PCR产物做第二次PCR的模版后,引物二聚体增加很多,也有目的条带出来,另外PCR体系的组分未变
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danyzj01

银虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by xiaoyanzi517 at 2012-05-04 16:01:39:
我一般初次PCR产物电泳,浓度一般在100ng/ul,然后二次PCR,同样的体系,将原来加DNA模板,改为加1ul 初次PCR的产物,都P出来了

P出来后引物二聚体多吗?

另外条带能比初次PCR更亮吗?
12楼2012-05-04 20:41:18
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你回收的PCR产物再做模板加的量是不是太多了?
未来不是梦
2楼2012-05-02 22:23:10
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danyzj01

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张宏宇123 at 2012-05-02 22:23:10:
你回收的PCR产物再做模板加的量是不是太多了?

模版量多还是别的东西多?
是直接以PCR产物做模版,不是回收琼脂糖胶上的PCR产物
3楼2012-05-02 22:36:05
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR产物一般都要稀释的,太浓了反而不容易做好。
4楼2012-05-02 23:25:40
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