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求可以去除真菌孢子，而不去掉蛋白的离心速度！！！
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| 最近在做真菌产纤维素酶的实验，在制备粗酶液的时候，离心速度一直把握不好，怕最后制备的上清有真菌的孢子，会影响最后的实验结果，弱弱的问哈，有没有同学对这方面有了解的，离心速度为多少时，既能够去除上清中的真菌孢子，又不影响蛋白的获得？ |
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zhang8826857: 金币+3, 鼓励交流 2012-04-30 18:17:51
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zhang8826857: 金币+3, 鼓励交流 2012-04-30 18:17:51
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其实，个人觉得膜滤之前还是要离心的。因为“膜”这个东西用过的人都知道：用着很蛋疼。 问个问题：你的酶会在发酵中析出？ 还是个人觉得：你可以做个实验：1、4000 rpm离心20分钟（我觉得这个速度初步除去孢子够了），在0.22 μm微滤酶液，测酶活；2、滤纸过滤2次，0.22 μ膜滤，测酶活。比较其差异。如果楼主想提高离心转速，可将“1”改为梯度实验。 呵呵，可能楼主会认为麻烦，纤维素酶活的滤纸法测定是酶活测定当中，比较简单的了。 |
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4楼2012-04-30 18:12:38
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