应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA干涉
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 802  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

iugogo

铜虫 (小有名气)

[求助] RNA干涉

请教一下大家，我最近做RNA干涉，dsRNA的浓度分别用了50，100，150ng/ul，ddH2O溶解，以ddH2O处理和未做任何处理的样品为对照。处理3天后做荧光定量发现，3种浓度的处理都比对照上调了好多倍，不知道是什么原因，请教一下！（模板测序过，是正确的）
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

iugogo

» 猜你喜欢
1楼 2012-04-29 23:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heath666

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1，确定RNAi是否有效。因为不是所有设计的dsRNA都会有效果，而且你只选择一个72h时间点是不够的，建议多设计几对dsRNA，并且多加几个时间点。
2，原则上RNA水平也不能完全代替蛋白水平，可以再用WB等检测下蛋白水平。
3，即使以上条件都满足，有的时候也确实存在这个问题，原因还不确定，可能与脱靶效应或者不同基因的相互作用有关。

希望能有帮助！
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-30 13:02:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iugogo

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
非常感谢heath666的解答！在plos one 有一篇文章中，RNAi后不同时间段表达量是先上调然后再下调。我那个实验从表型上看，RNAi应该是起到作用了，我再检测几个时间段，再设计几个dsRNA看看。非常感谢您的建议！
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-30 22:51:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2012-04-30 23:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
碰到上调的时候，确认一下，你做RT的引物和你的dsrna的片段两端是不一样；
要是一样的话，有时候会是dsrna里残留的dnd，如果rt引物设计在ds的外围，那就另当别论。
赞一下 回复此楼
活着就要让人感受到你的存在。
5楼2012-05-01 15:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongyingqian

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有个问题请教楼主，做对照用的dd水，有PH要求吗。还有注射量是多少啊，我最近也想做呢
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-29 11:29:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iugogo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dongyingqian at 2013-05-29 11:29:22
有个问题请教楼主，做对照用的dd水，有PH要求吗。还有注射量是多少啊，我最近也想做呢

我是用的DEPC处理水，没调PH值，用试剂盒里的buffer也行。根据注射对象的大小吧，要试一下，我注射的是虫子，有一个绿豆那么大，0.5微升左右，也死了一些，多了会死更多
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-29 17:40:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 iugogo 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +7 幸运哩哩 2026-03-22 11/550 2026-03-28 20:27 by 唐沐儿
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +9 lin0039 2026-03-26 9/450 2026-03-28 13:05 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 303求调剂 +7 安忆灵 2026-03-22 8/400 2026-03-27 11:46 by sanrepian
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +3 IceGuo 2026-03-26 4/200 2026-03-27 05:35 by user003
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭