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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教有关亚细胞定位。。。。。急。。。
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)

[求助] 请教有关亚细胞定位。。。。。急。。。

请问亚细胞的具体方法有哪些啊？
GFP亚细胞定位是神马意思 请问有GFP亚细胞定位的具体方法吗？能不能发给我一个。。谢谢拉 ahjxjiang@163.com
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1楼2012-04-26 20:55:01
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
“用荧光量子点标记有关蛋白质，进行起亚细胞定位也可以。”------这贴发到别处去了。。。你需要具体的protocols，我再给你找点，今天来不及了。
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3楼2012-04-27 10:51:29
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+2, 凌波丽童鞋很活跃哈~鼓励鼓励 2012-04-27 13:09:02
zhaohq1209: 金币+1, 想了一下，2个金币有点拿不出手啊，呵呵~ 2012-04-27 13:09:36
我爱沈泉: 金币+2, ★有帮助 2012-04-29 21:20:29
GFP亚细胞定位是神马意思 请问有GFP亚细胞定位的具体方法？
就是根据绿色荧光蛋白的发光显示出绿色荧光蛋白共价偶联的蛋白质在细胞的哪个位置，用荧光显微镜就可以观察。

请问亚细胞的具体方法有哪些啊？
方法多了，只要能够显示出生物大分子在细胞中的具体位置就行，比如胶体金，GFP，小分子染料，荧光共振能量转移。

胶体金和相应的印染加强见：
G.W.Hacker and Jiang Gu edit, Gold and Sliver Staining: Techniques in Molecular Morphology, CRC Press,2002,全文下载：http://ishare.iask.sina.com.cn/f/24051499.html
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2楼2012-04-27 10:46:03
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wen1023tao

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+3, 鼓励交流 2012-04-27 13:09:14
构建你的基因和GFP融合表达的 载体，前面的启动子用基因的自己的启动子，当然还要做几个对照，比喻启动子用35S 做阳性对照，还可以构建一个目的基因的启动子直接接GFP的对照，载体构建好了后导入细胞，然后用荧光显微镜或者共聚焦观察荧光位置，即可以确定目的基因的表达位置，及基因表达亚细胞定位，重组载体导入细胞可能还需要不同的手段，比喻做植物，需要将重组载体转化到农杆菌后再拿农杆菌去侵染，像打烟草或者直接侵染自己的植株等等。具体的情况还需要根据你的具体实验来设计，这里只是一个大概的过程
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4楼2012-04-27 10:52:11
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 10:51:29:
“用荧光量子点标记有关蛋白质，进行起亚细胞定位也可以。”------这贴发到别处去了。。。你需要具体的protocols，我再给你找点，今天来不及了。

谢谢
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5楼2012-04-27 20:30:18
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