| 查看: 2223 | 回复: 3 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
细胞裂解缓冲液的配制？求助各位大虾
|
||||
|
Sample Text 细胞裂解缓冲液 10mmol/l Tris-cl（PH8.0） 1mmol/l EDTA（PH8.0） 0.1%（m/V）SDS 这是分子克隆实验指南里面的一种缓冲液配方，用来提取动物基因组DNA，求教各位大虾，这是分开单独配还是混在一起配？分开单独配的话，那各自的量又是加多少？混一起配的话那具体是怎么配了？第一次做实验，实在搞不明白，请各位高手指教一下，不胜感激。。。。。。。。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生物学相关 | 我的实验 |
» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有290人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
求助各位大神，我需要一种仪器设备，请各位大虾们帮忙支招哈~~
已经有7人回复- 求助醋酸缓冲液配制
已经有5人回复
- 小弟求助各位大虾！
已经有16人回复
- 求助！！！pH6.0磷酸缓冲液的配制
已经有3人回复
- 求助各位大虾，孪生金相中这个形貌是什么组织，要如何解释？
已经有6人回复
- 用GhostXP重装系统后，网卡驱动无法找到，不能上网，急，求助各位大虾！
已经有2人回复
- 我的放线菌细胞壁很难破，求助各位大虾
已经有11人回复
- 【求助】求助各位大虾，生化池出现大量线虫怎么办
已经有14人回复
- 【求助/交流】磷酸盐缓冲液配制
已经有7人回复
- 【求助/交流】TAE电泳缓冲液的配制方法
已经有5人回复
- 【求助】小妹求助各位大虾红外分析相对强度问题
已经有15人回复
- 【求助/交流】培养基与缓冲液配制的问题
已经有9人回复
- 【求助】如何配制pH 8.0、50 mM 柠檬酸－磷酸缓冲液【有效期至2010年7月8日】
已经有9人回复
- 【求助/交流】紧急求助关于单细胞凝胶电泳实验
已经有11人回复
- 【求助/交流】HEPES和MOPS缓冲液的配制
已经有11人回复
yjchsh
铁杆木虫 (正式写手)
Dr.
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 5882.8
- 红花: 1
- 帖子: 825
- 在线: 282.3小时
- 虫号: 828425
- 注册: 2009-08-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★
西瓜: 金币+3, Thanks for your help~~~ 2012-04-29 17:38:03
西瓜: 金币+3, Thanks for your help~~~ 2012-04-29 17:38:03
|
I bet you are a beginner from the requestion you asked. I think you prepare stock solutions will be more convenient. You could make fresh lysis buffer every time. I bet you do not need too much lysis buffer each time. To make stocks: 1 M Tris (concentrated HCl adjust pH to 8.0). (weigh 12.1 g Tris and dissolve in 80 ml dH2O, add HCl to pH8.0, and then adjust volume to 100 ml with dH2O) 500 mM EDTA (Add 5 M NaOH adjust pH to pH8.0 to dissovle) (EDTA-Na is not soluble very well in neutral pH, so add 5M NaOH to dissovle first, then adjust pH to 8.0) 10% SDS (dissolve 5 g SDS in 50 ml dH2O) These stocks could be kept at room temperature for months. Use stocks above to make your fresh lysis buffer. Good luck with your experiments. |
3楼2012-04-29 11:22:52
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流问题。 2012-04-26 18:10:05
晏育伟: 金币+2, ★★★很有帮助, 很详细，谢啦。我按你说的方法去配。 2012-04-27 10:20:36
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流问题。 2012-04-26 18:10:05
晏育伟: 金币+2, ★★★很有帮助, 很详细，谢啦。我按你说的方法去配。 2012-04-27 10:20:36
|
嗯........... 是这样的，肯定需要混在一起配制，若你分开单独配制，必需先配成母液后混合，而短期使用的话，没有必要配成母液。 假设你需要1L这样的裂解液，在800mL的蒸馏水中溶解浓度为10mmol/L（具体添加多少g，你要自己算，我直接说只能是教懒人咯）的Tris，用市售盐酸调pH到8.0后，添加EDTA（或EDTA.2Na也可，没有区别），量同样你自己算，强烈搅拌完全溶解后，添加SDS至文中要求浓度，慢速搅拌至溶解（强烈搅拌会产生大量泡沫） 室温放置就可以了 祝实验顺利，若有说错请高手指点  |
2楼2012-04-26 16:46:36
4楼2012-05-03 09:54:59