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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于MTT的一些问题
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xueshu110

禁虫 (正式写手)
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1楼 2012-04-23 18:54:45
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kzdylr6

铁虫 (小有名气)
★ ★
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zhaohq1209: 金币+1, 鼓励交流。要是能说的更详细一点就好了 2012-04-23 23:09:17
不用加裂解液，直接加DMSO就是了
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2楼2012-04-23 19:14:51
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jessica-wang

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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zhaohq1209: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-23 23:09:02
不知道你是什么细胞，在加DMSO前，弃上清弃去了多少？
不过不管你弃多少，也不可能弃的很完全。对照组的意义，就在于调零，除去培养基及DMSO等对甲月赞吸光值的影响~
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3楼2012-04-23 21:01:16
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sl35537417

木虫 (正式写手)
★
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control 一开始 什么都不加  最后只加DMSO  上机
我在米国这个实验室都是这么做的
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4楼2012-04-24 04:40:25
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chimindu

捐助贵宾 (正式写手)

荧光DuBoss
★
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我用北京泛博生物化学公司的CCK试剂盒代替MTT，就没加DMSO，直接测。
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5楼2012-04-24 09:09:52
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pingan88

新虫 (小有名气)
★
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我觉得需要加，因为吸取培养液的过程中会有残留的，会影响OD值，我也试验过了，会有小的影响。
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6楼2012-04-24 10:07:05
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崔宁

新虫 (小有名气)
★
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首先，加DMSO前要不要吸出一部分我个人觉得都可以，往往大家吸出来是因为96孔板的1个孔最多只能容纳200ul左右溶液，可你加DMSO还是要加过量的（将全部甲赞沉淀都溶解），一般150ul。所以吸出上部溶液。总之，只要把对照做好就好。还有溶解甲赞除了用DMSO，还可以用酸性SDS，不是裂解液。
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7楼2012-04-24 16:24:27
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mamadexiao

木虫 (正式写手)
★
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我是这么做MTT的
1.空白（只加培养基）
2.正常对照（不加药的）
3处理组（加药）
处理时间之后，每孔直接加MTT（96孔，10ul）
2-4小时，弃去全部的培养基(这个时候，细胞全死了，剩下的就是细胞和MTT反应后的甲“瓒”结晶)
然后加DMSO，震荡10min，492读数
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8楼2012-04-24 20:49:27
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风逝zhilv
9楼2012-04-24 21:13:31
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yanglinlynn

金虫 (小有名气)
★
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培养基加入孔板中，即使后来被弃去，还是会有一部分附着在孔底的，所以还是会对OD值有影响的。不用加裂解液，只用DMSO就可以了
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10楼2012-04-24 23:07:06
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