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月落星沉

银虫 (初入文坛)

[求助] 43KDa的蛋白用截留分子量10KDa的聚醚砜膜超滤,蛋白为什么会透过去呢?

我浓缩蛋白时,用的是截留分子量10KDa的聚醚砜膜超滤,蛋白的分子量是43KDa。
结果,滤出液中测到的蛋白和加入前的浓度,酶活基本一样。也就是说蛋白都透过去了。
去年用的时候还好好的,蛋白回收率还蛮高的。今年用的是和去年同一批次买的膜,换了2张膜都截留不住蛋白,还有一张膜一开始的时候连水都透不过去,大家帮忙分析下是什么原因?先谢过了~
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
膜坏了,难道没有保存好?受潮了?长霉了?还是……
2楼2012-04-23 15:03:54
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by miaomiaomao at 2012-09-12 15:20:50
请问膜长霉了里面有脏东西怎么清洗?可以把膜装置拆开吗?...

你是什么膜包?小的好像不能拆,大的有些能拆(夹具装的)。一般可以用0.5M的NaOH清洗,太脏的话,清洗时间可以长点(1~2h)。霉菌长多了膜很容易坏掉,做个膜的完整性测试,再用。切记要保存好膜包,否则就废了。
关注我关注的
11楼2012-09-12 19:17:53
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普通回帖

silicare

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-04-23 19:58:43
月落星沉: 金币+10, ★有帮助 2012-04-29 00:02:04
既然你之前的都做过没问题,而且酶活也检测了,基本就是你的膜的问题了,
不过你说的是超滤?自己做的超滤管?检测一下是不是漏了,可以先简单透析一下看看
3楼2012-04-23 18:00:47
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

4楼2012-04-23 20:19:32
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stone856

银虫 (小有名气)

换新的试试吧。旧的不靠谱。
5楼2012-04-23 23:36:17
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sl35537417

木虫 (正式写手)

霸气侧漏
6楼2012-04-24 04:36:56
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是漏了,建议楼主换新的一批膜试试。
7楼2012-04-24 08:32:49
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eyeyeey

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
国内的膜多少都有问题,有条件可以试下国外的膜.
8楼2012-04-24 10:40:17
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果连接没问题,肯定是膜的问题了,用完的聚醚砜膜要保存在0.1M NaOH里,不能干掉,不能保存在其他溶剂里,否则时间长就会坏掉。你看下进出口压差,如果出口流速很快,压差很小,估计是膜破了,该换了。
关注我关注的
9楼2012-04-25 18:54:35
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miaomiaomao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-04-25 18:54:35
如果连接没问题,肯定是膜的问题了,用完的聚醚砜膜要保存在0.1M NaOH里,不能干掉,不能保存在其他溶剂里,否则时间长就会坏掉。你看下进出口压差,如果出口流速很快,压差很小,估计是膜破了,该换了。

请问膜长霉了里面有脏东西怎么清洗?可以把膜装置拆开吗?
吃嘛嘛香
10楼2012-09-12 15:20:50
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