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定量pcr标曲
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| 请教各位虫友：我之前做定量pcr（sybr green法）标准曲线，由于引物二聚体比较严重，10的5次方拷贝数以下就不准确了，现在考虑换一对新的引物，但是试着做了一下，也有个很严重的问题，就是所有的标准品Ct值几乎一样，我是做了梯度稀释，从10的2次方到10的八次方，不过没有非特异性产物，不知什么原因。我在想是不是需要重新做标准品呢？因为原来的标准品是用原来那个400bp左右的引物的pcr产物做克隆再提取质粒得到的，现在想换一对200bp左右的引物，需要重新做标准品吗吗？（注：我用新的引物试着扩增了一下原标准品，也有比较清晰的条带） |
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孙启亮
金虫 (著名写手)
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2楼2012-04-22 09:50:34