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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相测β-谷甾醇，不同的仪器得出的结果不一样？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 高效液相测β-谷甾醇，不同的仪器得出的结果不一样？

β-谷甾醇都是色谱纯甲醇后超声半小时溶解

第一台液相用的是205纳米，98：2=甲醇：水，250*4.6，柱温30，在7分处出一个峰，前面有3个杂志，标准品的峰只有85%左右

第二台液相也是同样条件，但是不出峰，换了254纳米其它不变，在5分多出一个主峰（0.010V，非常小），前面还是有2个小峰为主峰的十分之一和六分之一
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1楼 2012-04-21 22:21:43
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

浮萍happy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不一样，即使是相同型号的柱子在不同仪器上峰的保留时间也不一定一样。
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3楼2012-04-23 09:36:16
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
问题关键是波长的选择。前者205nm，这波长下甲醇的末端吸收很高；后者，此波长下目标物响应值极低。

若要用紫外检测器分析，建议先进行全波长扫描，选择最合适的分析波长。
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守候在风中的宁静。
4楼2012-04-23 12:38:40
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
★ ★
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 2012-04-24 06:40:13
引用回帖:
5楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-23 23:14:46:
全波长扫描最高的是190纳米，低波长根本不准吧

190nm，不行。或许考虑使用其他检测器。
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守候在风中的宁静。
6楼2012-04-23 23:18:53
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没有实力

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
danyzj01: 金币+12, ★★★很有帮助 2012-05-15 16:50:01
谷甾醇我做过紫外扫描的，最大紫外吸收在205-210 nm之间，到220 nm基本已经没有紫外吸收了，用254nm的不合适。从没见过文献用这个波长，它用这个可能是为了突出其它苯系物之类的分析物质吧。
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8楼2012-05-14 15:50:49
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at2011wjl

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-24 08:52:08
网上好多文献都用的205或者210，也有少数用240或254的，但是这些波长都没有样品峰出现...

甾醇在205-210nm之间出峰  你后来试的那个太高了
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10楼2013-02-28 10:46:01
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普通回帖

鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 2012-04-24 06:38:54
用的色谱柱是否相同，另外，你换个乙腈水系统试试。谷甾醇，就别用254nm了。
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我那么努力，就是为了在更高的层次遇见你！
2楼2012-04-23 09:04:09
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-23 12:38:40:
问题关键是波长的选择。前者205nm，这波长下甲醇的末端吸收很高；后者，此波长下目标物响应值极低。

若要用紫外检测器分析，建议先进行全波长扫描，选择最合适的分析波长。

全波长扫描最高的是190纳米，低波长根本不准吧
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5楼2012-04-23 23:14:46
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-23 23:18:53:
190nm，不行。或许考虑使用其他检测器。

网上好多文献都用的205或者210，也有少数用240或254的，但是这些波长都没有样品峰出现
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7楼2012-04-24 08:52:08
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vermouth325

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能是你做的样品在254nm的吸收不好，可以换一下波长
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我在看得見你的角落，給你安全感
9楼2012-05-14 16:20:31
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