| 查看: 1604 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
表达载体构建碰到诡异问题，请各路大神不吝赐教，拜谢。
|
||
|
事情是这样，我要构建一个表达载体，目的片段大约2000bp，后面要加GFP作为marker。筛出阳性克隆来之后，提质粒测序验证。这时诡异问题出现了，因为我这个基因比较大，需要用多个测序引物，比如A,B两个引物。A为正向，B为反向，两者有overlapping。从A的结果看，有一段是我的目的基因，而接下来的却是载体的序列（比如A的测序结果是500bp，前200bp是我的目的基因的序列，201-500却是载体的序列）。但是从B的结果看这500bp却都是我的目的基因的序列。不知道这是什么原因啊。 PS.测序结果都很好，没有杂峰和套峰。 如果问题解决，本人愿赠送100金币作为酬谢。谢谢各位了。 |
回复此楼» 猜你喜欢
科研孤儿太难了
已经有20人回复
-
项目信息和经费信息在系统里都可以看到了
已经有13人回复
-
国际合作可查了，中了面上
已经有10人回复
-
国合里面能看到了
已经有5人回复
-
学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了
已经有3人回复
-
出来了
已经有8人回复
-
国合现在查不到了吗？
已经有20人回复
-
牛来！米来！面来！
已经有8人回复
-
2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？
已经有27人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家都说说，自己面试过程中，遇到过的最难忘/最夸张/无厘头的面试问题？
已经有39人回复
- 弱弱的问个问题，在原子物理中，常说粒子从低能级跃迁到高能级，这个粒子到底是什么？
已经有25人回复
- 相似相容体积变化问题
已经有6人回复
- 有关合成烯丙基氯格氏试剂的一些问题
已经有7人回复
- 中科院博士复试问题
已经有5人回复
- 申报去英国公派访问学者的问题
已经有4人回复
- 关于中科院的学位外国的大学承认否的问题
已经有4人回复
- 特助立项依据问题
已经有3人回复
- Galen D. Stucky发表在Nano Today上的：用CNF纸做集流体解决锂枝晶问题
已经有119人回复
- LiPF6/EC+DEC电解液保存问题
已经有11人回复
- 关于乙烯基光固化活性的问题
已经有14人回复
- 现代军事类网络小说大神---纷舞妖姬----几部经典作品TXT版【转载】
已经有78人回复
- ++算符，诡异，求助
已经有8人回复
- 氯铱酸（H2IrCl6）和氧化铼毒性问题
已经有4人回复
3楼2012-04-21 21:56:13
ynkuaile
木虫 (小有名气)
- BioEPI: 2
- 应助: 86 (初中生)
- 金币: 1757.7
- 红花: 4
- 帖子: 270
- 在线: 73.4小时
- 虫号: 982579
- 注册: 2010-03-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2012-04-21 20:00:46
4楼2012-04-22 12:08:45
5楼2012-04-22 12:09:25
28