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丫头7976

铜虫 (正式写手)


[交流] 纯化后蛋白的SDS-PAGE

各位看看我的蛋白纯化后电泳图,是一个膜蛋白,纯化的倒是还可以就是条带有点模糊,像是拖尾一样,左边的两条带,右边的那条还是可以的,只不过是两次纯化的样品,感觉条件啥都一样啊,为什么会这样,又遇到过类似的情况的吗

SDS-PAGE
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colorfulmiao

木虫 (小有名气)


★ ★
丫头7976(金币+1): 谢谢参与
丫头7976: 金币+1, 可能是浓缩的程度不一样,导致两次样品浓度不一样,下次我离心试一试吧 2012-04-22 14:59:44
左边条带拖尾应该是溶质不纯的原因啦 离心一下就好 而且右边条带似乎浓度不高的样子 有降解吗?
4楼2012-04-22 13:25:05
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★ ★
丫头7976(金币+1): 谢谢参与
丫头7976: 金币+1, 谢谢你一直帮助我,我再调整一下浓度试一试 2012-04-22 15:01:12
SDS-PAGE电泳拖尾可能是杂蛋白或者样品浓度较大。解决方法:先对于样品进行离心或超滤,加上蒸馏水稀释,再上样电泳;如果效果还是不佳,建议做分子筛层析纯化后对于样品进行离心或超滤,加上蒸馏水稀释,再上样电泳。膜蛋白纯化可采用疏水层析。
2楼2012-04-21 22:13:27
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BioChemCom

银虫 (小有名气)


★ ★
丫头7976(金币+1): 谢谢参与
丫头7976: 金币+1, 我也不知道 可能是溴酚蓝吧 2012-04-22 15:00:25
说实在话的,没有看懂你的图。左边两个泳道都有两条带,右边那条泳道只有一条带。这是怎么回事呢?
3楼2012-04-22 11:04:11
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colorfulmiao

木虫 (小有名气)


★ ★
丫头7976: 金币+2, 是啊 我用的millipore家的超滤浓缩管,一是为了浓缩,二是为了除盐,咪唑,更换bufffuer,有时会损失很多,哎 膜蛋白给我带来了很多困扰。怎么办呢 这是我的蛋白降解了还是怎么的 2012-04-23 08:40:42
你是进行了超滤浓缩吗?还是聚乙二醇?浓缩条件是会影响电泳结果的呢。
5楼2012-04-22 23:42:41
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