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zoulong312

木虫 (小有名气)

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[交流] T4连接酶连接问题已有4人参与

TaKaRa T4 ligase 50µL连接体系过夜连接150ng外源片段和200ng载体后，加入1/10体积的3M 醋酸钠（pH5.2），混匀后，加入2.5倍体积的冷无水乙醇，-20℃静置6个小时后，12000rpm离心10后，没有看见沉淀正常吗？实验室有师兄说他的可以看见沉淀，不知道是不是我实验中出现了什么问题。请牛人指点迷津。

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Dragon

1楼 2012-04-20 20:10:50

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zoulong312

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

5楼: Originally posted by piggpi at 2012-04-20 23:31:21:
乙醇沉淀回收和试剂盒回收都会有一定的损失的，没有说哪个一定好。另外，乙醇沉淀离心后真能看到稍透明的沉淀说明提取回收质量很好，看不到也不见得就少，至少我回收后没看到过，但加水溶解后鉴定浓度也是可以的， ...

3Q，我下次也测一下浓度试试看。