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bclz

铁杆木虫 (正式写手)

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[求助] DNA提取时用到的酚是什么酚？怎么配置？

植物DNA提取时用酚和氯仿抽提，请问用到的酚是什么酚？怎么配置？市场上有现成的酚吗？

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1楼2012-04-18 10:41:50

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fwks3518

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助，很热心哈 2012-04-19 13:42:29

大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验，应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重整理除去诸如琨等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或者导致RNA和DNA的交联等。
苯酚在使用前必须平衡，使其pH在7.8以上，因为在酸性pH下DNA分配于有机相。平衡的方法：在68度水浴中士苯酚充分溶解，加入羟基喹啉至终浓度0.1%，加入等体积的1M tris-HCL（ph8.0），搅拌15分钟，静置分层，除去上层水相，重复两遍，最后使用ph试纸确认ph大于7.8，，然后加入等体积的氯仿/异戊醇（24:1），混匀，棕色瓶4度保存。