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wangzhiwei6858

金虫 (小有名气)

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[求助] 50金币求50mM磷酸缓冲液配方

准备要做绿藻细胞的酶活，查了很多文献，用的都是50mM磷酸盐缓冲液，pH为7.0和7.8。但是都没说配方，在此求助。
测酶活是不是要加NaCl和KCl，加多少？
请给出配方出处，急求，多谢。

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1楼2012-04-16 15:33:06

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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
wangzhiwei6858: 金币+10, ★有帮助, 感谢帮助 2012-04-17 10:31:22
wangzhiwei6858: 金币+5, ★有帮助 2012-04-17 10:33:25

PBS 是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：
母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水
0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4，
81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：
0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCL 的话，加入NaCL 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种PH 值的0.2M PB（100ml）配方：
pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）
5.7 93.5 6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 87.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62
7.1 33 67
7.2 28 72
7.3 23 77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13 87
7.7 10.5 90.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7

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日拱一卒，功不唐捐

7楼2012-04-16 18:39:35

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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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wangzhiwei6858: 金币+10, ★有帮助 2012-04-17 10:30:37
wangzhiwei6858: 金币+10, ★有帮助 2012-04-17 10:32:44

你可以先配成1M PB，然后稀释成50mm就可以了，或者你直接配成50mm PB 调节pH就可以了！

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I am not a hero , but I served with heroes！

2楼2012-04-16 15:46:46

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