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ericolivia

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 821686
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性别: GG
专业: 病毒学

[求助] 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！

我是个新手。尝试做qPCR。模版的最高浓度为0.1ng/μL，以10倍梯度稀释得到5个梯度。奇怪的结果如下。从溶解曲线和得到的R^2还有扩增效率来看，都挺正常的吧？就是ΔRn-循环数的图很奇怪，不是平滑的曲线。请问这是为什么呢？求解答~求帮助！

ΔRn-循环数

R^2和扩增效率

溶解曲线

标准曲线

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1楼 2012-04-16 10:53:20

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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-19 13:43:17
ericolivia: 金币+10, 换试剂以后确实好多了。我用了biorad的试剂，虽然还是没有平台期，但是至少没有折线了。。。呵呵。谢谢！ 2012-05-07 14:54:29

扩增曲线怎么没有平台期啊？应该是你的扩增程序有问题，这个程序不是自己设计的，一般跟机器，还有你所用的试剂有关，我以前用的是美国AB的7300，用宝生物的试剂，它的说明书就注明如果用AB的7300用什么程序，用7500用什么程序，根本就没提到样品