应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 同源重组敲除13KB大片段
91/1返回列表
查看: 2343  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看

syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 同源重组敲除13KB大片段

链霉菌同源重组要敲除13KB的大片段 2个同源臂距离13KB会不会造成2次同源臂同源重组低呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-06 22:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gywyl1977

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
syn1985: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-04-12 10:11:01
zhang8826857: 金币+2, MicEPI+1, good 2012-04-17 12:38:15
有可能。所以链霉菌用I-sceI技术，就是在拿到单交换后，导入一个I-sceI酶，它可以识别单交换上去的质粒骨架上的一个位点，从这里切开染色体，增加二次同源交换的几率。相关细节查文献，关键字就是I-sceI及链霉菌，应该可以查到。这个技术链霉菌里用的已经比较多了。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-04-06 22:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-04-06 22:27:39:
有可能。所以链霉菌用I-sceI技术，就是在拿到单交换后，导入一个I-sceI酶，它可以识别单交换上去的质粒骨架上的一个位点，从这里切开染色体，增加二次同源交换的几率。相关细节查文献，关键字就是I-sceI及链霉菌， ...

不知道含有这个酶的质粒哪里有卖的？
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-12 10:10:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gywyl1977

木虫 (正式写手)
建议根据发表的文章查一下国内做链霉菌的课题组，可以去信索取。
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-12 10:53:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
13kb应该没问题。同源重组主要看同源臂的长度，和被敲除基因长度没直接关系，在真菌里见过文献敲除100kb以上。
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-17 01:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-04-17 01:13:08:
13kb应该没问题。同源重组主要看同源臂的长度，和被敲除基因长度没直接关系，在真菌里见过文献敲除100kb以上。

那我敲13KB 同源臂1400bp 小不小呢
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-17 09:07:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by syn1985 at 2012-04-17 02:07:25:
那我敲13KB 同源臂1400bp 小不小呢

左右臂都1.4Kb,可以尝试...最好2kb以上吧
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-17 18:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pandajay

木虫 (小有名气)
现在链霉菌大片段敲除可以尝试用pcr-targeting 把这个系统建立好后 敲除大片段基因挺快速的
赞一下 回复此楼
8楼2012-04-20 10:29:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by pandajay at 2012-04-20 10:29:46:
现在链霉菌大片段敲除可以尝试用pcr-targeting 把这个系统建立好后 敲除大片段基因挺快速的

前期文库不是用cos质粒建的文库 所以没办法用这个方法
赞一下 回复此楼
9楼2012-04-20 10:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 syn1985 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:52 by o3EMxHUAQDtS
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 01:30 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭