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小欣1211

金虫 (小有名气)


[交流] 大家粗分过硅胶柱一般要多长时间

每次过柱子都不成功,因为时间太长,一不小心就干了,各位大侠一般粗分要多长时间,怎么我感觉一个梯度过一个星期还过不完?要是再换梯度不是要过几个月?

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allen.tsui

金虫 (正式写手)



karl2100: 金币+1, 谢谢参与讨论! 2012-04-06 00:28:50
引用回帖:
15楼: Originally posted by 小欣1211 at 2012-04-05 18:41:55:
1千克样品?那要多大的柱子啊?

内径13cm的柱子,空白硅胶高度与样品高度差不多1:1,我不到一天半换一梯度,近4000ml的柱体积吧,也就只冲了20天吧
22楼2012-04-05 20:58:58
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wddmq

木虫 (正式写手)



小欣1211(金币+1): 谢谢参与
什么叫粗分?就是强调大砍段,时间快。柱子跑干了是你自己实验不注意,时间长硅胶上残留量就大,效率也差。我一般把粗分控制在一周左右,喜欢用减压色谱,上样量大,速度快。
2楼2012-04-05 15:12:49
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小欣1211

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by wddmq at 2012-04-05 15:12:49:
什么叫粗分?就是强调大砍段,时间快。柱子跑干了是你自己实验不注意,时间长硅胶上残留量就大,效率也差。我一般把粗分控制在一周左右,喜欢用减压色谱,上样量大,速度快。

一周左右不是要一天一个梯度?可是一天根本洗不完啊,我们这里只有硅胶柱,顶多能在上面加个小泵,应该是加压柱吧,可是加压一天也冲不完啊
3楼2012-04-05 15:23:25
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wddmq

木虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 小欣1211 at 2012-04-05 15:23:25:
一周左右不是要一天一个梯度?可是一天根本洗不完啊,我们这里只有硅胶柱,顶多能在上面加个小泵,应该是加压柱吧,可是加压一天也冲不完啊

不是加压柱,是那种敞口粗短柱从底下抽的那种。梯度别太细了,你粗分后还是得慢慢来分,如果开始就分得太细的话,有些组分就变得很少,到后你还得合并。当然分的细不是坏事,但是很耗时间。
4楼2012-04-05 15:52:38
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