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guowei927111

金虫 (小有名气)

[求助] 大片段连接pET-28a表达载体

最近在做一个长6.9kb的目的片段连接pET-28a载体,连了几次没有连上,请问高手们有什么好办法没啊?
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再接再厉
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churchill87426

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实觉得Takara的SolutionI和T4效率都一般,不如Promega的T4。个人感觉而已。
9楼2012-03-31 17:57:32
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加大片段浓度,16度过夜连接
jiayoubashaonian
2楼2012-03-30 22:12:31
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

做过很多连接,但是最没信心做的就是大片段连接,特别是当片段与载体大小相近,或比片段还大时,这种连接基本都不大敢做。同问,看有没有这方面有经验的虫子。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-03-31 09:32:01
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以适当增加片段的用量和酶的用量试试
4楼2012-03-31 10:04:37
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