应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大片段连接pET-28a表达载体
51/1返回列表
查看: 2772  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

guowei927111

金虫 (小有名气)

[求助] 大片段连接pET-28a表达载体

最近在做一个长6.9kb的目的片段连接pET-28a载体，连了几次没有连上，请问高手们有什么好办法没啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
再接再厉
1楼 2012-03-30 21:12:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx6291

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目的片段回收产物 6.5 uL
pET-28a酶切回收产物  1 uL
Solution I  7.5uL
16度 3小时
应该就可以了
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-31 10:48:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加大片段浓度，16度过夜连接
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
2楼2012-03-30 22:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
做过很多连接，但是最没信心做的就是大片段连接，特别是当片段与载体大小相近，或比片段还大时，这种连接基本都不大敢做。同问，看有没有这方面有经验的虫子。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
3楼2012-03-31 09:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以适当增加片段的用量和酶的用量试试
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-31 10:04:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭