| 查看: 2953 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yixinyuan木虫 (正式写手)
|
[求助]
实时荧光RT-PCR实验的相关问题
|
||
| 想开展实时荧光RT-PCR实验，但是不知道要准备些什么器械和试剂，听说有试剂盒卖的，不知道哪种的好？还有试剂盒内有哪些成分，具体的操作步骤怎样，要注意哪些细节方面？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生物 |
» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有131人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
实时荧光定量PCR仪器使用问题
已经有5人回复- Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
已经有7人回复
- 求助！关于RT-PCR的问题！
已经有20人回复
- 向RTPCR高手求助，关于RTPCR的空白对照问题
已经有9人回复
- RT-PCR相关问题
已经有5人回复
- ＲＴ－ＰＣＲ问题求助
已经有18人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】实时荧光定量pcr的问题
已经有7人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（二）
已经有12人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
yixinyuan: 回帖置顶 2012-03-28 21:00:00
|
楼主可看看这个资源，里面有很多定量PCR的知识： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3234286&fpage=1 |
5楼2012-03-28 10:39:15
2楼2012-03-27 23:10:09
xiaoyugutou 
捐助贵宾 (小有名气)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 162.7
- 散金: 290
- 红花: 1
- 帖子: 215
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 1716151
- 注册: 2012-03-25
- 专业: 细胞周期与调控
3楼2012-03-27 23:20:59
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+4, Good！想不想在“专家顾问”的名单里占个座？\(^o^)/~ 2012-03-28 10:37:28
yixinyuan: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-28 20:52:52
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+4, Good！想不想在“专家顾问”的名单里占个座？\(^o^)/~ 2012-03-28 10:37:28
yixinyuan: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-28 20:52:52
|
嗯............ 今天有好多童鞋问qPCR哦  1. 先确定你要准备做什么，是基因的表达分析，还是其他应用（我没有过其他方面应用，所以不清楚哦），这涉及到定量的两个应用分支：相对定量和绝对定量。 2. 确定你的分析方法，是SYBR Green I 法或TaqMan法，SYBR Green I 法通用性强，省钱省力，但致命弱点是其非特异结合所有双链核酸，可能造成假阳性结果，所以SYBR Green I 法需要从引物到模板任何方面下足功夫。TaqMan法木用过，虽然知道优缺点，但也不便多说咯。 3. 如果确定你要使用SYBR Green I 法，下边需要准备的是： （1）靠谱试剂公司的SYBR Green I Master Mix （2）和靠谱的一台定量PCR仪（用过一些qPCR仪，但最讨厌伯乐！！！，伯乐粉丝不要喷我......） 4. 不知你指的盒子是什么？我们都是直接买预混液的，Invitrogen、TOYOBO的都不错，主要看哪家打折狠........因为这个东西确实蛮贵的 5. qPCR注意细节众多，需要实践中一步步碰到再解决，刚开始就问这个，也不好解答.....抱歉 希望有所帮助 若有错，请高手指点 |
4楼2012-03-27 23:32:15