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yixinyuan木虫 (正式写手)
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[求助]
实时荧光RT-PCR实验的相关问题
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| 想开展实时荧光RT-PCR实验，但是不知道要准备些什么器械和试剂，听说有试剂盒卖的，不知道哪种的好？还有试剂盒内有哪些成分，具体的操作步骤怎样，要注意哪些细节方面？ |
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孙启亮
金虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 我们也用的Takara~这实验还是很贵的，楼主还是多准备下再上马。 2012-03-28 18:53:34
yixinyuan: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-28 20:54:02
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西瓜: 金币+2, 我们也用的Takara~这实验还是很贵的，楼主还是多准备下再上马。 2012-03-28 18:53:34
yixinyuan: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-03-28 20:54:02
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首先，我觉得你要知道你们实验室以前做qPCR都是什么方法，是探针法还是染料法。 若是染料法，首先你得设计引物，设计方法同普通PCR的方法一样，染料法有缺点，对此楼上已经表述了。我们用的染料是takara的，便宜也比较好使。做荧光的话只需要买染料就可以了。 其次，楼主还得买提取RNA的试剂，RNase plus，也就是trizol，还有逆转录的试剂，逆转录酶啊，缓冲液了，等等，楼主可以去查这些试剂。 最后，希望楼主多了解下PCR原理，这样在以后的实验中可以少犯些错误，同时对自己以后遇到的困难也会着手解决，千万不能一眼抹黑的往前走 |
6楼2012-03-28 18:35:02