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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 蛋白质中内毒素的去除
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C-JingX

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质中内毒素的去除 已有2人参与

求助：想做一个致病菌分泌蛋白的功能，打算纯化出蛋白，将其与人细胞共孵育，检测细胞因子的变化，请问在与细胞相互作用前是不是应该先将纯化的蛋白中内毒素去除，如何去除呢？
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走自己的路，不要追逐别人的脚步！
1楼 2012-03-27 10:32:09
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long0316

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

内毒素带强的负电荷，与蛋白质相比与阴离子柱结合能力更强，可以通过柱层析方法进行分离，如果样品不适合用柱层析方法，可以通过Triton X-114相分离方法进行分离
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9楼2015-11-26 16:55:57
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.你的蛋白的分子量是多少，如果小的话可以用超滤；
2.你的蛋白的等电点是多少，确定后可用离子柱进行去除，但要是内毒的量大的话，可能要多重复几次。
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C-JingX
dasheng1980
2楼2012-03-27 10:47:46
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C-JingX

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by dasheng1980 at 2012-03-27 10:47:46:
1.你的蛋白的分子量是多少，如果小的话可以用超滤；
2.你的蛋白的等电点是多少，确定后可用离子柱进行去除，但要是内毒的量大的话，可能要多重复几次。

谢谢，我的蛋白是40kDa左右，等电点是5.19
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走自己的路，不要追逐别人的脚步！
3楼2012-03-27 15:46:15
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
C-JingX: 金币+2, ★有帮助, 哦，这样啊，主要还是想自己做 2012-03-27 19:43:10
既然纯化，必须要不内毒素去除掉，自己不想摸索条件的话，可以让一些公司给你们做的。
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4楼2012-03-27 19:18:55
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