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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我想将pcr片段转入大肠杆菌内
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 我想将pcr片段转入大肠杆菌内

我想将PCR片段转入大肠杆菌内，其他人都用的电击转化，我这做不了电击转化，化转可以吗？有这么做过的没呀？我转了两次，都没成功，有成功的没？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼2012-03-27 01:13:01
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+3, 我这必须转片段呀，不能用载体呢，化转靠谱不？ 2012-03-27 18:34:02
使用T载体，然后冰浴30min  42度热击45s  再冰浴3min  加液体培养基  37度摇菌1h  涂板  长12h  挑菌划线  再培养8h  菌落PCR 验证
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11楼2012-03-27 16:30:17
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+5, 谢谢呀 2012-03-27 09:16:47
先连T载体，氯化钙法就能转大肠杆菌，不需要电击转化。
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2楼2012-03-27 07:43:49
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imyting

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+1, 能，能，这个我有办法，就是不知道该咋转进去呀，不用电击可以吗 2012-03-27 09:13:54
PCR片段直接转入大肠杆菌中能表达吗？
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5楼2012-03-27 08:49:59
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bbwalkman

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhang8826857: 金币+5 2012-04-10 13:54:26
1.要是制备感受态细胞，然后转化到细菌体内
2.通过基因枪试试呢
3.PEG介导应该也可以。。
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6楼2012-03-27 09:29:55
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