| 查看: 2575 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
如何测定样品中活体微生物数量？
|
|||
|
问题如下：提取土壤等环境样品中的总DNA，采用常规的细菌或者真菌通用引物或者某种特定基因的引物进行定量PCR，那么得出来的是应该是该样品中的总物种数量。但这个数量应该也包括一些已经死亡的微生物的DNA衍生的值（死亡细胞有一部分DNA未被降解），应该不准确。 请教高手，有没有一种方法，将土壤样品中的死亡细胞中的DNA去除，然后用荧光定量PCR方法测定活体细胞的总DNA数量？谢谢。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 猜你喜欢
0854 考研调剂 招生了！AI 方向
已经有14人回复
-
328求调剂
已经有3人回复
-
一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂
已经有5人回复
-
招08考数学
已经有14人回复
-
一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂
已经有4人回复
-
0854电子信息求调剂 324
已经有3人回复
-
303求调剂
已经有3人回复
-
336求调剂
已经有3人回复
-
306求调剂
已经有9人回复
-
工科0856求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求教：细菌过程中，培养基中剩余氮源的含量如何测定？
已经有22人回复
- 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)
已经有10人回复
- 宏基因组学技术在识别复杂环境样品中微生物的结构组成及功能中的应用
已经有5人回复
- 如何测定培养基中的残糖含量
已经有22人回复
- 如何用熔点法测定G+C mol%含量？
已经有3人回复
见神一笑
木虫 (著名写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 4301.8
- 散金: 2000
- 红花: 6
- 帖子: 1083
- 在线: 118.3小时
- 虫号: 648935
- 注册: 2008-11-08
- 专业: 生物信息学
8楼2012-03-29 12:35:57
疯狂修行者
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3121.2
- 散金: 753
- 红花: 8
- 帖子: 721
- 在线: 111.2小时
- 虫号: 332393
- 注册: 2007-03-26
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+6, BioEPI+1, 鼓励帮助解答问题！ 2012-03-26 19:54:04
在雨中: 金币+40, ★★★很有帮助 2012-03-26 20:02:53
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+6, BioEPI+1, 鼓励帮助解答问题！ 2012-03-26 19:54:04
在雨中: 金币+40, ★★★很有帮助 2012-03-26 20:02:53
|
你利用的类似宏基因组的方法，提取土壤等环境样品中的总DNA，采用常规的细菌或者真菌通用引物或者某种特定基因的引物进行定量PCR，测定的是大部分微生物的DNA的情况。你没有必要做所谓的活细菌啊。因为：微生物的生命周期很短，你在做的时候肯定有死的有活的菌株，而你做的DNA中所包含的菌株就是反应土壤中微生物的情况啊，为什么一定要研究当时活的那一部分呢？ 除非你做的土壤要经过特殊处理，那你就知道特殊处理的针对的菌株了。那可以根据那个菌株信息进行培养实验啊。 另外，目前可培养的微生物只是很少的一部分，还有你的方法做的也是只一部分，不可能把所有菌株做全的，这样的话，你所追求的活菌，就没有什么意义了。 我只是根据你以上的叙述，给你回复。但是我不太明白，你为什么要做土壤中，活细菌的数量？你的实验想得到什么方面的结果呢？你要干什么事情呢？按照你所说，你得到的活菌的情况要干什么呢？ |
2楼2012-03-26 17:17:11
疯狂修行者
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3121.2
- 散金: 753
- 红花: 8
- 帖子: 721
- 在线: 111.2小时
- 虫号: 332393
- 注册: 2007-03-26
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
3楼2012-03-26 17:29:44
4楼2012-03-26 20:02:17
40