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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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司马诸葛

木虫 (正式写手)

[求助] 过表达

请问:过表达的外源基因A与内源基因A同源性高达90%,如何确定外源基因A已经表达呢?RT-PCR没法设计特异性引物,WB抗体也没有特异性。。。。愁!

[ Last edited by 司马诸葛 on 2012-3-16 at 15:27 ]
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以用荧光定量PCR的方法,引物设计在两个基因同源的部分,比较含有外源基因的样品以及对照样品的相对表达量就可以了。
比如说对照样品的表达量为1,含有外源基因的样品的表达量为5,那么5-1=4就是外源基因的相对表达量啦。
14楼2012-03-23 17:53:46
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stfoxst

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, Good! 2012-03-21 18:54:47
带上报告基因呀。比如GFP,这是最通用的策略。
AndGodsaid,Lettherebelight:andtherewaslight.
2楼2012-03-20 22:41:05
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司马诸葛

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stfoxst at 2012-03-20 22:41:05:
带上报告基因呀。比如GFP,这是最通用的策略。

没有报告基因!怎么办?
3楼2012-03-21 13:08:59
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
酶切加入到报告基因的质粒里面呢 然后不就知道了
4楼2012-03-21 14:57:09
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