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lx19880717

金虫 (初入文坛)

[求助] pET-28a原核不能表达目的蛋白已有2人参与

我在做原核表达的过程中,使用了pET-28a载体,Rosetta(DE3)表达菌株,但是37℃诱导表达后,连包涵体都没有看到,基本没有任何的蛋白表达,所以想请问一下大家,能不能帮我分析一下是什么原因?谢谢。
PS:我的目的蛋白大量重复序列,是否是由于重复序列导致蛋白在表达过程中无法折叠,如果是这个原因有什么办法可以解决,谢谢。
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农科院523

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by pwj at 2012-03-14 21:50:12
试试TB培养基,以前我也遇到同样问题,换了TB培养基就好了!希望你能成功

请问一下 TB培养基 摇菌的时候 也加抗生素吗
whatafuckingwork
11楼2012-06-12 21:47:00
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