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jamy1989木虫 (小有名气)
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信号分子
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| 现在从链霉菌中表达出了一种调控蛋白并提纯了,通过验证这种调控蛋白能和基因 D结合,结合后能调节该菌株次级代谢产物的产生,但这种结合必须是在加培养液上清的条件下!所以上清中必然存在着某种信号分子,那么,现在要找到这种信号分子有什么好的方法吗? |
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凌波丽
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西瓜: 金币+3, 很热心哈 2012-05-22 08:24:16
西瓜: 金币+3, 很热心哈 2012-05-22 08:24:16
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补充一下:24楼的贴,钓出来与基因D直接作用的蛋白质(假定为蛋白质X)的相互作用的为止蛋白质(处于要研究的特定信号通路中,假定为蛋白质Y),蛋白质X与蛋白质Y因为直接相互作用在催化剂作用下呗中间臂连接在一起,因为蛋白质Y是未知的,所以分离出来蛋白质X与蛋白质Y的交联体后要用酯酶、酰胺酶或化学试剂将两者再切开,然后用质谱结合胰蛋白酶有限酶解蛋白质Y,再从数据库中搜索之并加以鉴定。 另外,这步也可以用分子印迹法。 再有研究DNA-Protein也可以用ChIP,这是一种共价交联方法,是DNA与Protein的共价交联。 |
28楼2012-05-21 21:08:15
西瓜
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2楼2012-03-17 14:35:23
a731705125
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3楼2012-03-17 14:56:16
jamy1989
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