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新的表达一直诱导不出来
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最近合成了一段基因,然后按老板的意思用PET-40b作为载体连接,转导进实验室保存的BL21之后,挑取阳性克隆测序,证明目的基因已经转入。 接着就是表达,挑取单克隆37℃ 200rpm 4h摇菌,接着加IPTG诱导剂,28℃ 100rpm 4h,可是跑电泳诱导前后没有明显差异。随后我尝试了不同诱导温度、时间、诱导剂终浓度,结果都没有变化。 请问,有人知道为什么吗?求指导! |
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