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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 求助：非常困惑！LPS刺激THP-1没有检测到TNF-a 等各类细胞因子
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wujing1728

金虫 (小有名气)

[求助] 求助：非常困惑！LPS刺激THP-1没有检测到TNF-a 等各类细胞因子

这是我准备做炎症细胞模型的，现在没法进行，请好心人指点：
       我用1ug/ML 的LPS （sigma）刺激THP-1细胞，24小时后取上清用BD公司CBA检测TH1/TH2/细胞因子谱，居然都是接近零。
      重复一次 LPS浓度( 0,10ng,100ng,1000ng,10ug,20ug,50ug) / ml,孵育细胞24小时，取上清上机，结果仍然没有。
     这是我准备做炎症细胞模型的，现在没法进行，请好心人指点。
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静坐常思己过，闲谈莫论人非。
1楼 2012-03-08 09:25:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wujing1728

金虫 (小有名气)
将细胞用PMA 100nm 刺激分化成kuffer，大概要72h以上，之后就按照正常程序来做，可以看到想要的结果了。希望虫友们少走弯路。大家一起加油！
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静坐常思己过，闲谈莫论人非。
4楼2012-03-12 09:37:50
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普通回帖

wujing1728

金虫 (小有名气)
找到办法了，自我鞭策一下，继续努力！
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静坐常思己过，闲谈莫论人非。
2楼2012-03-10 12:34:34
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msuno100

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wujing1728 at 2012-03-10 12:34:34:
找到办法了，自我鞭策一下，继续努力！

什么方法呀0.0？
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3楼2012-03-11 10:47:38
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yjkang6587

银虫 (小有名气)
kuffer 是什么意思，求楼主解释。
  为什么要用PMA刺激呢？ 我在做LPS刺激BV2细胞，也是刺激不出来，求楼主指点。
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5楼2012-12-13 15:20:35
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失踪的夏天

木虫 (正式写手)
我先马克一下！以后做时说不定能用到。哇哈哈！
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生活在此处，当下就是今生。
6楼2012-12-13 16:20:45
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erin若水

新虫 (初入文坛)
正要开始做，我也马克下
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7楼2012-12-21 12:11:12
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风zzz

金虫 (小有名气)
楼主，我是用LPS刺激VEC，做损伤模型的，但是LPS刺激没有剂量依赖性，我分别用了0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml。都没有剂量依赖性，而且刺激的效果也比较差，就是说细胞存活率依然很高！
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态度决定一切！
8楼2013-01-09 09:35:21
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wyh0903

金虫 (初入文坛)
我做的PMA刺激不需要72h
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9楼2013-03-05 17:21:17
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neoplasma

铁虫 (初入文坛)
需要用PMA预刺激
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10楼2013-03-13 16:11:39
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